Dactolisib (BEZ235)

CatalogusnummerS1009 Batch:S100919

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H23N5O
Moleculair gewicht 469.55 CAS-nr. 915019-65-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 9 mg/mL (19.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Dactolisib (BEZ235, NVP-BEZ235) is een dubbele ATP-competitieve PI3K en mTOR remmer voor p110α/γ/δ/β en mTOR(p70S6K) met een IC50 van respectievelijk 4 nM /5 nM /7 nM /75 nM /6 nM in celvrije assays. Het remt ATR met een IC50 van 21 nM in 3T3TopBP1-ER cellen, induceert autophagy en onderdrukt HIV-1 replicatie. Fase 2.
Doelen
p110α
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 mTOR (p70S6K)
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)		 ATR
(3T3TopBP1-ER cells)		 Meer bekijken
4 nM 5 nM 6 nM 7 nM 21 nM
In vitro Dactolisib (BEZ235) vermindert significant de fosforyleringsniveaus van het mTOR geactiveerde kinase p70S6K. Dit resulteert in een verlaging van de S235/S236P-RPS6 niveaus met een IC50 van 6,5 nM. De activiteit van deze verbinding tegen mTOR wordt bepaald met behulp van een biochemische mTOR K-LISA assay met een IC50 van 20,7 nM. Het vertoont een iets lagere activiteit tegen zijn β-paraloog met een IC50 van 75 nM. De PI3K/Akt/mTOR route is vaak constitutief geactiveerd in menselijke tumorcellen. BEZ235 blokkeert de PI3K en mTOR kinase activiteit door te binden aan de ATP-bindingsspleet van deze enzymen. Beide PTEN-nul cellijnen PC3M en U87MG vertonen een dosisafhankelijke vermindering van celproliferatie bij behandeling met toenemende concentraties ervan met een gemiddelde GI50 van 10-12 nM. Het is een mTORC1/2 katalytische remmer.
In vivo Dactolisib (BEZ235) induceert regressie van de tumoren (69%) zonder statistisch significant effect op gewichtstoename. Al met al tonen deze voorlopige in vivo werkzaamheidsresultaten aan dat het ziektestase veroorzaakt wanneer het oraal wordt toegediend als enkelvoudig middel en de werkzaamheid van andere antikankermiddelen kan verbeteren wanneer het wordt gebruikt in combinatiestudies.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • In vitro proteïne kinase, PI3K en mTOR assays

    PI3Kα, β en δ eiwitten zijn samengesteld uit het iSH2 domein van p85 NH2-terminaal gefuseerd aan het volledige p110 eiwit, met uitzondering van α dat ook de laatste 20 aminozuren niet bevat. PI3Kγ wordt geproduceerd als volledig eiwit, zonder de eerste 144 aminozuren. Alle constructen zijn gefuseerd aan een COOH-terminale His-tag voor gemakkelijke zuivering en vervolgens gekloneerd in de pBlue-Bac4.5 (voor α, β en δ isoformen) of pVL1393 (voor γ isoform) plasmiden. De verschillende vectoren worden vervolgens gecotransfecteerd met BaculoGold WT genomisch DNA met behulp van methoden aanbevolen door de leverancier voor de productie van de respectievelijke recombinante baculovirussen en eiwitten. Dactolisib (BEZ235) wordt getest op zijn activiteit tegen PI3K met behulp van een Kinase-Glo assay. De kinase reactie wordt uitgevoerd in een 384-wells zwarte plaat. Elke put wordt geladen met 50 μL testitems (in 90% DMSO) en 5 μL reactiebuffer die 10 μg/mL PI substraat bevat (l-α-fosfatidylinositol; Avanti Polar Lipids; bereid in 3% octyl-glucoside) en de PI3K eiwitten (respectievelijk 10, 25, 10 en 150 nM van p110α, p110β, p110δ en p110γ) worden er vervolgens aan toegevoegd. De reactie wordt gestart door de toevoeging van 5 μL van 1 μM ATP bereid in de reactiebuffer en wordt geïncubeerd gedurende 60 (voor p110α, p110β en p110δ) of 120 min (voor p110γ). Het wordt beëindigd door de toevoeging van 10 μL Kinase-Glo buffer. De platen worden vervolgens afgelezen in een Synergy 2 reader voor luminescentiedetectie.
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    HCT116, DLD-1 and SW480 cells

  • Concentraties

    0-1 μM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    The human CRC cell lines, HCT116 (PIK3CA mutant; kinase domain at H1047R), DLD-1 (PIK3CA mutant; helical domain at E545K), and SW480 (PIK3CA wild-type) and isogenic DLD-1 PIK3CA mutant as well as wild-type cells are maintained in DMEM with 10% FBS and 1 × Penicillin/Streptomycin. Cells are plated at different initial densities (HCT116: 3 × 103 cells/well, DLD-1: 5.5 × 103 cells/well, SW480: 4.5 × 103 cells/well, DLD-1 PIK3CA mutant: 7 × 103 cells/well, and DLD-1 PIK3CA wild-type: 9 × 103 cells/well) to account for differential growth kinetics. After 16 hours, cells are incubated with increasing concentrations of Dactolisib (BEZ235), and the drug-containing growth medium is changed every 24 hours. Cell viability is assessed 16 hours after the initial plating and 48 hours after initiation of treatment with this compound using the colorimetric MTS assay CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, as per the manufacturer's instructions. Cell viability after drug treatment is normalized to that of untreated cells also grown for 48 hours. For western blot analysis, cells are plated with zero or maximum inhibitory dose (500 nM) of it for 2, 6, 24, or 48 hours.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Female Harlan athymic nude mice

  • Doseringen

    45 mg/kg

  • Toediening

    p.o.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18606717/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21966435/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21791089/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20606035/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21412767/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22662154/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20876803/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21552262/

Klantproductvalidatie

<p>Three-dimensional responses of MCF7/IGF-1R cells to TAM (1 μM), E2 and IGF-1. Compared to parental MCF7 cells (a), MCF7/IGF-1R cells (b) in three-dimensional (3D) culture formed bigger acini in response to IGF-1 stimulation and displayed significant TAM resistance when treated with TAM (1 μM) + E2 + IGF-1, which was removable by kinase inhibitors BMS-536924, U0126 and BEZ235 (c). Cells (10,000/well) were seeded in 96-well plates. Acini were formed on 100% Matrigel and cultured for 14 days in starving medium containing 2% Matrigel and 5% charcoal/dextran-stripped fetal bovine serum with the treatments as indicated. Concentrations used: TAM (1 μM), E2 (1 nM) and IGF-1 (100 ng/mL). Confocal image original magnification, × 20. Red, rhodamine phalloidin (actin). Blue, Hoechst blue stain. Results are representative of two individual experiments.</p>

Gegevens van [ Breast Cancer Res , 2011 , 13, R52 ]

<p>TAM (10 nM) agonistic behavior in MCF7/IGF-1R cells is not inhibited by phosphatidylinositol 3-kinase/Akt inhibitor BEZ235. (a) Inhibitory effects of kinase inhibitors BMS-536924, U0126 and BEZ235 on agonistic effect of TAM (10 nM) in the presence of IGF-1 (100 ng/mL). **P < 0.01. (b) Inhibitory effects of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt inhibitor BEZ235 at various dose ranges on IGF-1R signaling. (c) Agonistic behavior of TAM (10 nM) in response to BEZ235 kinase inhibitor. (-), no BEZ235. Results are representative of three independent experiments. Data are expressed as means ± SD.</p>

Gegevens van [ Breast Cancer Res , 2011 , 13:R52 ]

<p>A, ANOVA of IC50 values of the dual PI3K/mTOR inhibitor NVP-BEZ235 in 23 melanoma cell lines showing no significant difference in sensitivity to this compound in B-Raf mutant and Braf wild-type cells. B, decreases in pAkt and pP70S6K in a dose and time-dependent fashion in 2 melanoma cell lines treated with NVP-BEZ235. pP70S6K levels are undetectable at all concentrations and time points studied, whereas levels of pAkt start rising again after 4 hours of drug exposure in a dose-dependent fashion. C, clonogenic assays in 2 melanoma cell lines (YUVON and YUSIK) treated with NVP-BEZ235 at different concentrations. NVPBEZ235 was effective in inhibiting colony formation at low nanomolar concentrations.</p>

Gegevens van [ Clin Cancer Res , 2010 , 16, 6029-6039 ]

<p>Relative kinase activities of p110α mutants and the inhibitory effect of PI3K inhibitors against hotspot mutants of p110α. A, recombinant FLAG-tagged PI3K p110α/p85α protein complex produced in 293T cells was immunoprecipitated , and the immunoprecipitates were used for the quantitative PI3K-HTRF assay (32).</p><div><div>B, effect of three PI3K inhibitors (ZSTK474, LY294002, and NVP-BEZ235) on the enzymatic activity of two hotspot mutants (E545K and H1047R) p110α compared with the wild-type. No striking difference was observed in the IC50 concentrations of these inhibitors between wild-type and mutant p110α.</div><div> </div></div><p> </p>

Gegevens van [ Cancer Res , 2010 , 70, 4982-4994 ]

Sellecks Dactolisib (BEZ235) Is geciteerd door 519 Publicaties

Neuroimmune Microenvironment Reprogramming via Immuno-piezoelectric Transducers for Synergistic Stem Cell Therapy in Traumatic Brain Injury [ Adv Mater, 2025, e12810.] PubMed: 41030193
Ataluren improves hematopoietic and pancreatic disorders in Shwachman-Diamond syndrome patients: a compassionate program case-series [ Nat Commun, 2025, 16(1):8189] PubMed: 40897730
TIGIT deficiency promotes autoreactive CD4+ T-cell responses through a metabolic‒epigenetic mechanism in autoimmune myositis [ Nat Commun, 2025, 16(1):4502] PubMed: 40374622
Spatial covariance reveals isothiocyanate natural products adjust redox stress to restore function in alpha-1-antitrypsin deficiency [ Cell Rep Med, 2025, 6(1):101917] PubMed: 39809267
Heterogeneous Activation of Signaling Pathways and Therapeutic Vulnerabilities in KSHV-Associated Primary Effusion Lymphoma Cell Lines [ J Med Virol, 2025, 97(8):e70534] PubMed: 40751690
Macrophage CCL7 promotes resistance to immunotherapy for colorectal cancer by regulating the infiltration of macrophages and CD8+ T cells [ J Immunother Cancer, 2025, 13(11)e013027] PubMed: 41290259
YAP1 promoter-associated noncoding RNA affects Ewing sarcoma cell tumorigenicity by regulating YAP1 expression [ Cell Mol Biol Lett, 2025, 30(1):63] PubMed: 40414844
Perilipin2-dependent lipid droplets accumulation promotes metastasis of oral squamous cell carcinoma via epithelial-mesenchymal transition [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):30] PubMed: 39875372
Depleting the action of EZH2 through PI3K-mTOR inhibition to overcome metastasis and immunotherapy resistance in triple-negative breast cancer [ Mol Cancer Ther, 2025, 10.1158/1535-7163.MCT-24-0693] PubMed: 40497697
Changes in Melanoma Cell Morphology Following Inhibition of Cell Invasion by Third-Generation mTOR Kinase Inhibitors [ Int J Mol Sci, 2025, 26(16)7770] PubMed: 40869090

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.