AEE788 (NVP-AEE788)

CatalogusnummerS1486 Batch:S148601

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H32N6
Moleculair gewicht 440.58 CAS-nr. 497839-62-0
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (199.73 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving AEE788 (NVP-AEE788) is een potente remmer van EGFR en HER2/ErbB2 met een IC50 van respectievelijk 2 nM en 6 nM. Het is minder potent tegen VEGFR2/KDR, c-Abl, c-Src en Flt-1, en remt Ins-R, IGF-1R, PKCα of CDK1 niet. Dit middel heeft Fase 1/2 klinische proeven bereikt.
Doelen
EGFR
(Cell-free assay)		 HER2/ErbB2
(Cell-free assay)		 c-Abl
(Cell-free assay)		 FLT1
(Cell-free assay)		 c-Fms
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
2 nM 6 nM 52 nM 59 nM 60 nM
In vitro AEE788 (NVP-AEE788) remt ook KDR, c-abl, c-Src en Flt-1 met IC50 van 50-80 nM. Het is niet gevoelig voor ErbB-4, PDGFR-β, Flt-3, Flt-4, RET en c-Kit en heeft geen remmende werking op Ins-R, IGF-1R, PKC-α en PKA. Dit middel remt potent EGFR-fosforylering in A431-cellen met een IC50 van 11 nM. Het remt ook de fosforylering van KDR in CHO-cellen en erbB2 in BT-474-cellen, zonder enig effect op PDGF-geïnduceerde fosforylering in A31-cellen. Het remt de proliferatie van NCI-H596, MK, BT-474 en SK-BR-3-cellen met IC50 van respectievelijk 78, 56, 49 en 381 nM. Verder heeft het de extra eigenschap dat het de cellulaire proliferatie remt die wordt aangedreven door EGFR-mutanten, waaronder 32D/EGFR en 32D/EGFRvIII. Het remt bovendien zowel EGF- als VEGF-gedreven HUVEC-proliferatie met IC50 van respectievelijk 43 en 155 nM. Het remt de fosforylering van EGFR, VEGFR2, Akt en MAPK in menselijke cutane SCC-cellijnen (Colo16, HaCaT, SRB1 en SRB12-cellen), wat leidt tot groeiremming en inductie van apoptose. Het remt de fosforylering van EGFR en Akt in HT29-cellen bij 0,2 tot 1,0 μM. Het remt celproliferatie en voorkomt EGF- en neureguline-geïnduceerde HER1, HER2 en HER3-activering in medulloblastoom-cellijnen. Het vertoont groeiremmende activiteiten in chemosensitieve en chemoresistente medulloblastoom-cellen.
In vivo AEE788 (NVP-AEE788) veroorzaakt een dosisafhankelijke remming van tumorgroei in NCI-H596 of DU145 xenograftmodellen, met slechts kleine veranderingen in lichaamsgewicht. Het induceert tumorregressie met 57% bij 50 mg/kg in het NeuT/erbB2 GeMag-model en remt potent EGF-geïnduceerde EGFR-fosforylering in A431-tumoren en erbB2-fosforylering in GeMag-tumoren. Dit middel remde dosisafhankelijk angiogenese geïnduceerd door VEGF en remt bFGF-geïnduceerde angiogenese niet. Het onderdrukt de groei van het tumorvolume met 54% in Colo16-xenografts bij 50 mg/kg, wat te wijten is aan de remming van fosforylering van EGFR, VEGFR, Akt en MAPK. Bij 50 mg/kg remt het ook de groei van tumoren in het coecum en peritoneum (>50%) en vermindert het de incidentie van lymfekliermetastase tot 70% in HT29-cellen geïmplanteerd in het coecum van naakte muizen, zonder verlies van lichaamsgewicht en grove tekenen van neovascularisatie. Het verlaagt significant de expressieniveaus van pEGFR en pVEGFR in HT29 coecale tumoren en verandert die van EGF, VEGF, EGFR of VEGFR niet. Gecombineerd met CPT-11 resulteert het in significant kleinere tumoren en volledige remming van lymfekliermetastase. Dit middel remt de groei van Daoy, DaoyPt en DaoyHER2 xenografts met respectievelijk 51%, 45% en 72%. Het zou LBH589-gemedieerde generatie van reactieve zuurstofsoorten in K562-tumorcellen kunnen bevorderen, wat op zijn beurt apoptose verhoogt.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Protein Kinase Assays

    De in vitro Protein Tyrosine Kinase-assays voor AEE788 (NVP-AEE788) worden uitgevoerd in 96-wells platen (30 μL) bij omgevingstemperatuur gedurende 15-45 min met behulp van de recombinante glutathion S-transferase-gefuseerde kinasedomeinen (4-100 ng, afhankelijk van de specifieke activiteit). [γ33P]ATP wordt gebruikt als fosfaatdonor en polyGluTyr-(4:1) peptide als acceptor. Met uitzondering van Protein Kinase C-α, cycline-afhankelijke kinase 1/cycB en Protein Kinase A worden protaminesulfaat (200 μg/mL), histone H1 (100 μg/mL) en het heptapeptide Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly (bekend als Kemptide Bachem) respectievelijk als peptidesubstraten gebruikt. Assays worden geoptimaliseerd voor elke kinase met behulp van de volgende ATP-concentraties: 1,0 μM (c-Kit, c-Met, c-Fms, c-Raf-1 en RET), 2,0 μM (EGFR, erbB2, ErbB3 en ErbB4), 5,0 μM (c-abl), 8,0 μM (Flt-1, Flt-3, Flt-4, Flk, KDR, FGFR-1 en Tek), 10,0 μM (PDGFR-β, Protein Kinase C-α en cycline-afhankelijke kinase 1) en 20,0 μM (c-Src en Protein Kinase A). De reactie wordt beëindigd door toevoeging van 20 μL 125 mM EDTA. Dertig μL (c-abl, c-Src, insuline-achtige groeifactor-1R, RET-Men2A en RET-Men2B) of 40 μL (alle andere kinases) van het reactiemengsel wordt overgebracht op Immobilon-polyvinylideenfluoride membraan, voorbevochtigd met 0,5% H3PO4 en gemonteerd op een vacuümmanifold. Vervolgens wordt vacuüm aangebracht en wordt elke put gespoeld met 200 μL 0,5% H3PO4. Membranen worden verwijderd en vier keer gewassen met 1,0% H3PO4 en één keer met ethanol. Gedroogde membranen worden geteld na montage in een Packard TopCount 96-wells frame en met toevoeging van 10 μL/well Microscint. IC50-waarden (±SE) worden berekend door lineaire regressieanalyse van het percentage remming en zijn gemiddelden van ten minste drie bepalingen.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    T24, BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596 cells

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    4 or 6 days

  • Methode

    Methylene Blue Cell Proliferation Assay. Cells are seeded at 1.5 × 103 cells/well into 96-well microtiter plates and incubated overnight at 37 °C, 5% v/v CO2 and 80% relative humidity. On day 1, dilutions of AEE788 (NVP-AEE788) are added, with the highest concentration being 10 μM. After incubation of the cell plates for an additional 4 (T24) or 6 (BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596) days, cells are fixed with 3.3% v/v glutaraldehyde, washed with water, and stained with 0.05% w/v methylene blue. After washing, the dye is eluted with 3% HCl and the absorbance measured at 665 nm with a SpectraMax 340 spectrophotometer. IC50 values are determined by mathematical curve-fitting and are defined as the drug concentration leading to 50% inhibition of net cell mass increase compared with untreated control cultures.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    NCI-H596, DU145, A431, B16 and oncogenic NeuT-transfected HC11 cells in female BALB/c nu/nu (nude) mice

  • Doseringen

    50 mg/kg

  • Toediening

    Dosed orally

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15256466/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15756022/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15867367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20885895/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17317822/

Klantproductvalidatie

<p>EGFR-SGLT1 interaction is irresponsive to modulators of EGFR’s tyrosine kinase. A: Immunoprecipitation coupled Western blot analysis ofinteractionsbetween EGFR-HA and SGLT1-FlaginHEK293 cells treatedwith EGF or AEE788. EGFR, total EGFR; pEGFR, phosphorylated EGFR; IP, immunoprecipitation; IB, immunoblot. Input, expression levels of indicated exogenous proteinsin HEK293 whole celllysates used for the IP.</p>

, , The Prostate, 2013, 73:1453-1461.

Representative images of mitochondria of PC3 cells treated with DMSO, EGF (20 ng/ml) AEE788 (a small molecular EGFR inhibitor at 6 μM) or AEE788+EGF for 24 h. Mitochondria were stained with Mitotracker Red and images were taken with a confocal microscope.

Gegevens van [ , , Cell Cycle, 2014, 13(15):2415-30 ]

Sellecks AEE788 (NVP-AEE788) Is geciteerd door 13 Publicaties

A community challenge for a pancancer drug mechanism of action inference from perturbational profile data [ Cell Rep Med, 2022, 3(1):100492] PubMed: 35106508
Comprehensive pharmacogenomic characterization of gastric cancer. [ Genome Med, 2020, 18;12(1):17] PubMed: 32070411
Targeting the non-canonical roles of PCNA modifies and increases the response to targeted anti-cancer therapy [ Oncotarget, 2019, 10(68):7185-7197] PubMed: 31921382
Rationale for Using Irreversible Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitors in Combination with Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibitors for Advanced Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. [ Mol Pharmacol, 2019, 95(5):528-536] PubMed: 30858165
Targeted reduction of the EGFR protein, but not inhibition of its kinase activity, induces mitophagy and death of cancer cells through activation of mTORC2 and Akt. [ Oncogenesis, 2018, 7(1):5] PubMed: 29358623
Synergistic induction of apoptosis by salinomycin and gefitinib through lysosomal and mitochondrial dependent pathway overcomes gefitinib resistance in colorectal cancer. [ Oncotarget, 2017, 8(14):22414-22432] PubMed: 26461472
A high-content EMT screen identifies multiple receptor tyrosine kinase inhibitors with activity on TGFβ receptor [ Oncotarget, 2016, 7(18-:25983-6002] PubMed: 27036020
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 25965827
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 26378037
Phosphorylation of Mutationally Introduced Tyrosine in the Activation Loop of HER3 Confers Gain-of-Function Activity [Hu Z, et al. PLoS One, 2015, 10(4):e0123623] PubMed: 25853726

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.