alleen voor onderzoeksdoeleinden

Purmorphamine Smoothened-receptoragonist

Name: Purmorphamine
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S3042
Rating: 5 (61 reviews)

Cat.nr.S3042

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI), dat direct bindt aan en Smoothened activeert, blokkeert BODIPY-cyclopamine binding aan Smo met een IC50 van ~ 1,5 μM in HEK293T-cellen en is tevens een inductor van osteoblastdifferentiatie met een EC50 van 1 μM. Purmorphamine kan zowel basale als geïnduceerde autophagy verminderen.

Purmorphamine Hedgehog/Smoothened Agonist Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 520.62

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.97%

99.97

Gerelateerde doelwitten	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Overig Hedgehog/Smoothened Inhibitoren	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT 61 (NSC 136476) SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 BMS-833923 HPI-4 (Ciliobrevin A) Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D PF-5274857

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
C3H10T1/2	Function assay		6 days	Activity at Smo in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of cell differentiation into osteoblast incubated for 6 days by alkaline phosphatase assay, EC50 = 0.8 μM.	27429255
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells after 30 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 1 μM.	16408088
C3H10T1/2	Function assay			Induction of osteogenesis in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of osteoblast specific marker alkaline phosphatase by immunofluorescence method, EC50 = 1 μM.	16408003
HEK293T	Function assay		1 hr	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo expressed in HEK293T cells after 1 hr by fluorescence microscopy, IC50 = 1.5 μM.	16408088
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells assessed as beta-galactosidase activity after 30 hrs by luciferase reporter gene assay in presence of 100 nM 3-keto-N-aminoethyl-N'-aminocaproyldihydrocinnamoyl cyclopamine	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo N-terminal cysteine domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo C-terminal cytoplasmic domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht	520.62	Formule	C₃₁H₃₂N₆O₂	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	483367-10-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	Shh Signaling Antagonist VI			Smiles	C1CCC(CC1)N2C=NC3=C(N=C(N=C32)OC4=CC=CC5=CC=CC=C54)NC6=CC=C(C=C6)N7CCOCC7

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 4 mg/mL (7.68 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	2%DMSO 1 30%PEG300 2 5%Tween80 3 63%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	1.000mg/ml (1.92mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 20 μL of clarified DMSO stock solution of 50 mg/ml to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened (HEK293T cells) ~1.5 μM
In vitro	Purmorphamine activeert de Hedgehog-route door direct te binden aan en Smoothened te activeren met een IC50 van ~ 1,5 μM in competitie met cyclopamine, een Smo-antagonist. Deze verbinding is een krachtige inductor van osteogenese in multipotente C3H10T1/2-cellen. De EC50 (gebaseerd op ALP-expressie) voor deze chemische stof is 1 μM in C3H10T1/2-cellen. Het (1 μM) en BMP-4 (100 ng/mL) samen verhogen de ALP-activiteit meer dan 90-voudig in 3T3-L1-cellen. In tegenstelling tot BMP-4 induceert deze verbinding osteogenese door Hedgehog-signalering te activeren in multipotente mesenchymale progenitorcellen.
Kinase Assay	Bindingstest
Kinase Assay	Smo-bindingstests worden uitgevoerd met BODIPY-cyclopamine en Smo-overexpressiecellen zoals eerder beschreven4,5, met behulp van CMV-promotor-gebaseerde, SV40-oorsprongbevattende expressieconstructen voor Smo-Myc3, de deletiemutant Smo∆CRD (deletie van aminozuren 68 tot 182), en Smo∆CT (deletie van aminozuren 556 tot 793). HEK 293T-cellen worden gekweekt op poly-D-lysine-behandelde glazen dekglaasjes in 12-well platen tot 70% confluentie en vervolgens getransfecteerd met het juiste expressieconstruct (0,5 μg/well) met behulp van FuGene 6 volgens de fabrikant
In vivo	Purmorphamine reguleert de ALP-expressie in menselijke mesenchymale Stem Cells-gebaseerde constructen op ratten omhoog.
Referenties	[1] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=16408088 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12465946/ [3] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=15380183 [4] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=23228449 [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32194421/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	PMID
Western blot	Patch1 / Gli1 / LC3 / p62	26609469
Immunofluorescence	SOX18	26588701
Growth inhibition assay	Cell viability	26588701

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):