Home Protein Tyrosine Kinase EGFR Remmer Poziotinib (NOV120101, HM781-36B)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) EGFR Remmer

Cat.nr.: S7358

Poziotinib is een irreversibele pan-HER-remmer met IC50 van respectievelijk 3,2 nM, 5,3 nM en 23,5 nM voor HER1, HER2 en HER4. Poziotinib induceert ook apoptosis en G1-celcyclusarrest. Fase 2.
Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) EGFR Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 491.34

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.37%
99.37

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
A431 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A431 cells expressing wild type EGFR incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.0009 μM. 28754471
SKBR3 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SKBR3 cells expressing wild type HER2 incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.001 μM. 28754471
Ba/F3 Function assay Inhibition of human EGFR T790M/L858R mutant expressed in mouse Ba/F3 cells, IC50 = 0.0022 μM. 28754471
insect cells Function assay Inhibition of GST-tagged human EGFR catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.0032 μM. 28754471
Ba/F3 Function assay Inhibition of human EGFR T790M mutant expressed in mouse Ba/F3 cells, IC50 = 0.0042 μM. 28754471
insect cells Function assay Inhibition of GST-tagged human HER2 catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.0053 μM. 28754471
NCI-H1975 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human NCI-H1975 cells expressing EGFR T790M/L858R mutant incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.0057 μM. 28754471
HS27 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HS27 cells expressing wild type HER2 incubated for 72 hrs by MTS assay, GI50 = 3.83 μM. 28754471
SKBR3 Anticancer assay 72 hrs Anticancer activity against Erb-B2 overexpressing human SKBR3 cells assessed as cell growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, ID50 = 0.0003 μM. ChEMBL
A431 Anticancer assay 72 hrs Anticancer activity against EGFR overexpressing human A431 cells assessed as cell growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, ID50 = 0.0004 μM. ChEMBL
Sf21 Function assay 10 mins Inhibition of N-terminal GST-tagged human EGFR (696 to end residues) expressed in baculovirus infected Sf21 cells using poly (Glu,Tyr)4:1 as substrate preincubated for 10 mins followed by substrate addition measured after 1 hr by fluorescence polarization, IC50 = 0.0013 μM. ChEMBL
NCI-H1975 Anticancer assay 48 hrs Anticancer activity against human NCI-H1975 cells assessed as cell growth inhibition after 48 hrs by celltiter one shot solution assay, IC50 = 0.0027 μM. ChEMBL
Sf21 Function assay 10 mins Inhibition of N-terminal GST-tagged recombinant human EGFR T790M mutant expressed in baculovirus infected Sf21 cells using poly (Glu,Tyr)4:1 as substrate preincubated for 10 mins followed by substrate addition measured after 1 hr by fluorescence polarizat, IC50 = 0.0044 μM. ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 491.34 Formule

C23H21Cl2FN4O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1092364-38-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen HM781-36B, NOV120101 Smiles COC1=C(C=C2C(=C1)N=CN=C2NC3=C(C(=C(C=C3)Cl)Cl)F)OC4CCN(CC4)C(=O)C=C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (199.45 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
HER1
(Cell-free assay)
3.2 nM
HER2
(Cell-free assay)
5.3 nM
HER4
(Cell-free assay)
23.5 nM
In vitro
Poziotinib specifically inhibits the cell growth in HER2 amplified gastric cancer cells, and inhibits the phosphorylation of EGFR and key components of downstream signaling cascades such as STAT3, AKT and ERK. This compound also induces apoptosis and G1 cell cycle arrest by activating the mitochondrial pathway in HER2 amplified gastric cancer cells. Furthermore, it also exerts synergistic effects with chemotherapeutic agents in both HER2 amplified and HER2 non-amplified gastric cancer cells.
Kinase Assay
Enzymactiviteitsbepaling
Om de IC50-waarden van Poziotinib voor kinase-inhibitie te bepalen, worden enzymen van EGFR, HER2 en HER4 tot expressie gebracht als recombinante eiwitten in Sf9-insectencellen. Vervolgens wordt een enzymselectiviteitsscreening uitgevoerd met behulp van een tyrosinekinase-assaykit. Kortom, de reacties worden uitgevoerd in 96-well polystyreenplaten met ronde bodem die kinasebuffer bevatten, bestaande uit 100 mM HEPES (pH 7,4), 25 mM MgCl2, 10 mM MnCl2 en 250 μM Na3VO4. De reacties worden geïnitieerd door de toevoeging van 100 ng/assay-enzym, 100 μM ATP en 10 ng/mL poly(Glu, Tyr). Na 1 uur incubatie bij kamertemperatuur worden de reacties beëindigd door toevoeging van 6 mM EDTA-oplossing en vervolgens anti-fosfotyrosine-antilichaam, PTK Green Tracer en FP-verdunningsbuffermengsels. De fluorescentiepolarisatiewaarden worden vervolgens gemeten na 30 minuten bij kamertemperatuur met behulp van een Victor3-microplaatlezer. Ten slotte werden de IC50-waarden berekend met behulp van de volgende vergelijking: Y = bottom + (top–bottom)/(1 + 10(X-logIC50)).
In vivo
In nude mice bearing N87 human gastric cancer xenografts, Poziotinib (0.5 mg/kg p.o.) alone significantly inhibits the growth of tumors, and coadministraion of this compound and 5-FU causes more effective tumor inhibition. In addition, this compound shows excellent antitumor activity in a variety of EGFR- and HER-2-dependent tumor xenograft models, including erlotinib-sensitive HCC827 NSCLC cells, erlotinib-resistant NCI-H1975 NSCLC cells, HER-2 overexpressing Calu-3 NSCLC cells, NCI-N87 gastric cancer cells, SK-Ov3 ovarian cancer cells and EGFR-overexpressing A431 epidermoid carcinoma cancer cells.
Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Cleaved caspase-3 / Cleaved caspase-9 / PARP / Bcl-2 pEGFR / EGFR / pHER2 / HER2 / BMX / pERK / ERK / pAKT / AKT
S7358-WB1
25761479
Growth inhibition assay Cell viability
S7358-viability1
25761479

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT04436562 Completed
Healthy
Spectrum Pharmaceuticals Inc
 May 29 2020 Phase 1
NCT03804515 Terminated
Solid Tumor
Spectrum Pharmaceuticals Inc
 June 25 2019 Phase 1