Home MAPK p38 MAPK Remmer PH-797804

alleen voor onderzoeksdoeleinden

PH-797804 p38 MAPK Remmer

Cat.nr.S2726

PH-797804 is een nieuwe pyridinonremmer van p38α met een IC50 van 26 nM in een celvrije test; 4 keer selectiever dan p38β en remt JNK2 niet. Fase 2.
PH-797804 p38 MAPK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 477.3

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.07%
99.07

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human U937 cells Function assay Inhibition of p38alpha kinase-dependent HSP-27 phosphorylation in human U937 cells, IC50=0.00105 μM
human monocytes Function assay Antiinflammatory activity in human monocytes assessed as inhibition of LPS-induced TNFalpha production, IC50=0.0034 μM
human PBMC Function assay Antiinflammatory activity in human PBMC assessed as inhibition of LPS-induced TNFalpha release pretreated for 1 hr before LPS treatment measured after 18 hrs, IC50=0.015 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 477.3 Formule

C22H19BrF2N2O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 586379-66-0 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC1=C(C=C(C=C1)C(=O)NC)N2C(=CC(=C(C2=O)Br)OCC3=C(C=C(C=C3)F)F)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 96 mg/mL (201.13 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 20 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
p38α
(Cell-free assay)
26 nM
p38β
(Cell-free assay)
102 nM
In vitro
Deze verbinding blokkeert LPS-geïnduceerde TNF-α-productie en p38-kinaseactiviteit in de humane monocytische U937-cellijn, met vergelijkbare IC50 van 5,9 nM en 1,1 nM. Het heeft geen remmend effect op de JNK-route (c-Jun-fosforylering) of de ERK-route (ERK-fosforylering) in U937-cellen bij concentraties tot 1 μM. Dit chemische middel remt RANKL- en M-CSF-geïnduceerde osteoclastvorming op een concentratieafhankelijke manier, met een IC50 van 3 nM in primaire rattenbeenmergcellen. IC50-waarden voor deze verbinding tegen de volgende targets zijn bepaald als groter dan 200 μM (tenzij gespecificeerd): CDK2, ERK2, IKK1, IKK2, IKKi, MAPKAP2, MAPKAP3, MKK7 (>100 μM), MNK, MSK (>164 μM), PRAK, RSK2 en TBK1, wat betekent dat de activiteit van deze chemische stof specifiek is.
Kinase Assay
P38-kinaseassay
Een harsvangstassaymethode wordt gebruikt om de fosforylering van epidermaal groeifactorreceptorenpeptide (EGFRP) of GST-c-Jun door p38-kinasen te bepalen. Reactiemengsels bevatten 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM magnesiumacetaat, ATP (in de aangegeven concentratie), 0,05 tot 0,3 μCi [γ-33P]ATP, 0,8 mM dithiothreitol en ofwel 200 μM EGFRP of 10 μM GST-c-Jun voor p38α-kinasereacties. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van 25 nM p38α-kinase om een eindvolume van 50 μl te verkrijgen. De p38α-kinasereacties worden 30 minuten bij 25 °C geïncubeerd. Onder deze omstandigheden is de productvorming voor beide p38α-kinasen lineair met de tijd. De reactie wordt gestopt en het ongereageerde [γ-33P]ATP wordt verwijderd door de toevoeging van 150 μl AG 1 × 8 ionenuitwisselingshars in 900 mM natriumformiaat, pH 3,0. Eenmaal grondig gemengd, worden de oplossingen 5 minuten laten staan. Een aliquot van 50 μl van het kopvolume met het gefosforyleerde substraat wordt uit het mengsel verwijderd en overgebracht naar een 96-wells plaat. MicroScint-40 scintillatiecocktail (150 μL) wordt aan elk putje toegevoegd en de radioactiviteit wordt gekwantificeerd met behulp van een TopCount NXT microplaat-scintillatie- en luminescentieteller.
In vivo
Orale toediening van PH-797804 remt effectief acute ontstekingsreacties die worden veroorzaakt door systemisch toegediend endotoxine bij zowel ratten als cynomolgusapen. Deze behandeling met het middel gedurende 10 dagen toont robuuste ontstekingsremmende activiteit in chronische ziekte modellen, waardoor zowel gewrichtsontsteking als geassocieerd botverlies significant worden verminderd bij streptokokken celwand-geïnduceerde artritis bij ratten en muis-collageen-geïnduceerde artritis. Dosis-respons analyse resulteerde in ED50-waarden van 0,07 mg/kg en 0,095 mg/kg bij respectievelijk ratten en cynomolgusapen. Het remt LPS-geïnduceerde TNF-α, IL-6 en MK-2 activiteit op een dosis- en concentratieafhankelijke manier in een humaan endotoxine uitdaging model.
Referenties

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT01217918 Completed
Healthy
Pfizer
 October 2010 Phase 1
NCT00827515 Withdrawn
Pain
Pfizer
 February 2009 Phase 1
NCT00614705 Completed
Neuralgia Postherpetic
Pfizer
 April 2008 Phase 2
NCT00620685 Completed
Arthritis Rheumatoid
Pfizer
 March 2008 Phase 2