Home TGF-beta/Smad TGF-beta/Smad Remmer LY364947

alleen voor onderzoeksdoeleinden

LY364947 TGF-beta/Smad Remmer

Cat.nr.: S2805

LY364947 (HTS 466284) is een krachtige ATP-competitieve remmer van TGFβR-I met een IC50 van 59 nM in een celvrije test, en toont een 7-voudige selectiviteit ten opzichte van TGFβR-II.
LY364947 TGF-beta/Smad Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 272.3

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.93%
99.93

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
mink Mv1Lu lung cells Function assay Inhibition of TGFbeta R1 induced transcriptional activation of p3TP-Lux in mink Mv1Lu lung cells, IC50=0.04 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of human Transforming growth factor (TGF) beta-1 receptor (T204D mutation) autophosphorylation in Sf9 cells, IC50=0.051 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R1 expressed in Sf9 cells, IC50=0.059 μM
HepG2 cells Function assay Inhibition of TGF-beta-induced expression of PAI-luciferase reporter in HepG2 cells, IC50=0.06 μM
NIH3T3 cells Function assay Inhibitory activity against TGF-beta-stimulated proliferation in NIH3T3 cells, IC50=0.081 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R2 expressed in Sf9 cells, IC50=0.4 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 272.3 Formule

C17H12N4

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 396129-53-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen HTS 466284 Smiles C1=CC=C2C(=C1)C(=CC=N2)C3=C(NN=C3)C4=CC=CC=N4

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 4 mg/mL (14.68 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TGFβRI
(Cell-free assay)
59 nM
RIPK2
(Cell-free assay)
0.11 μM
CK1δ
(Cell-free assay)
0.22 μM
TGFβRII
(Cell-free assay)
0.4 μM
MLK-7K
(Cell-free assay)
1.4 μM
In vitro
LY364947 is an ATP competitive and tight-binding inhibitor, inhibiting phosphorylation of P-Smad3 by TGFβR-I kinase with Ki of 28 nM. This compound inhibits in vivo Smad2 phosphorylation within the NMuMg cells with IC50 of 135 nM. It reverses TGF-β-mediated growth inhibition in NMuMg cells with IC50 of 0.218 μM. This chemical potentiates the xVent2-lux BMP4 response in NMuMg cells by 30% at concentrations as low as 0.25 μM. It (2 μM) prevents TGF-β-induced epithelial−mesenchymal transition in NMuMg cells. This compound (3 μM) induces expression of Prox1 and LYVE-1 in almost all HDLECs after 24 hours. It promotes nuclear export of Foxo3a, with low Smad2/3 and high Akt phosphorylation levels in leukaemia-initiating cells. This chemical (< 20 μM) suppresses leukaemia-initiating cells colony-forming ability after co-culture with OP-9 stromal cells.
Kinase Assay
Filterbindingsassay
De IC50 van LY364947 bij verschillende enzymconcentraties wordt bepaald door de filterbindingsassay. Typisch worden 40 μL reacties in 50 mM HEPES bij pH 7,5, 1 mM NaF, 200 μM pKSmad3(−3) en 50 mM ATP, die een titratie van elke remmer met concentraties van 1600, 800, 400, 200, 100, 50, 25 en 0 nM bevatten, gedurende 30 min bij 30 °C geïncubeerd. De IC50 wordt berekend met behulp van een niet-lineaire regressiemethode met GraphPad Prism-software. Het bindingstype wordt bepaald door de correlatie tussen enzymconcentraties en IC50-waarden uit te zetten.
In vivo
LY364947 (1 mg/kg i.p.) accelerates lymphangiogenesis, as evidence by significantly increased the LYVE-1-positive areas, in a mouse model of chronic peritonitis. This compound significantly increases the LYVE-1-positive areas in tumor tissues in tumor xenograft models using BxPC3 pancreatic adenocarcinoma cells. This chemical increases p-Akt and decreases nuclear Foxo3a in leukaemia-initiating cells in CML-affected mice.
Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18310502/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20130650/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20080567/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot FOXC2 / p-Smad / Smad / p-p38 / p38 / p-ATF2 / ATF2
S2805-WB1
26804168
Immunofluorescence TEEB
S2805-IF1
31387632