Home TGF-beta/Smad TGF-beta/Smad Remmer LDN-193189

alleen voor onderzoeksdoeleinden

LDN-193189 BMP-signaleringsremmer

Cat.nr.S2618

LDN-193189 (DM3189) is een selectieve BMP-signaleringsremmer, die ALK1, ALK2, ALK3 en ALK6 remt met IC50s van respectievelijk 0,8 nM, 0,8 nM, 5,3 nM en 16,7 nM in de kinase-assay. LDN-193189 remt de transcriptionele activiteit van de BMP type I-receptoren ALK2 en ALK3 met IC50s van respectievelijk 5 nM en 30 nM in C2C12-cellen, en vertoont een 200-voudige selectiviteit voor BMP ten opzichte van TGF-β. Voor celtesten wordt de wateroplosbare S7507 LDN-193189 2HCl aanbevolen. Dit product heeft een slechte oplosbaarheid, dierexperimenten zijn mogelijk, cel experimenten gelieve zorgvuldig te kiezen!
LDN-193189 TGF-beta/Smad Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 406.48

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.43%
99.43

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
C2C12 Kinase Assay inhibits the kinase activity of ALK4 and ActRIIA with IC50 values of 101 and 210 nm, respectively 25368322
EOC216 Growth Inhibition Assay 0.1-10 μM 2-10 d DMSO induce cell death in a dose-dependent manner 25227893
OVAC429 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
SKOV3 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
OVCA429 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
EOC219 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
A549 Growth Inhibition Assay 0.5-16 μM DMSO inhibits cell growth in a dose-dependent manner 24778011
BEAS-2B  Growth Inhibition Assay 0.5-16 μM DMSO inhibits cell growth in a dose-dependent manner 24778011
hBMSCs Function Assay 0.2 μM 7 d abolishes the silibinin-promoted ALP activity partly 24076187
PANC-1 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
MIA PaCa-2 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
Bx-PC3 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
PC3  Function Assay 500 nM 2 h represses activation of Smad1/5/8 and P-Smad3 levels 22452883
LNCaP Function Assay 0–500 nM 2 h reverses rapamycin-induced cell death 22452883
EOC Function Assay 10-1000 nM 72 h reduces the phosphorylated BMP R-Smad1/5/8  22249415
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits BMP2-induced phosphorylation of Smad1/5/8 with an IC50 of ~0.005 μM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits the ability of ALK2 to phosphorylate GST-Smad1 with an IC50 of 45 nM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits the ability of ALK3 to phosphorylate Smad1 with an IC50 of 100 nM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits ALK4 and ALK5 with IC50 values of 0.3 μM and 0.5 μM respectively 21740966
C2C12 Function assay 30 mins Inhibition of BMP6-induced ALK2 transcriptional activity in mouse C2C12 cells expressing BRE-Luc after 30 mins by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.014 μM. 30227946
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
fibroblast cell qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
KB-3-1 Function assay P-glycoprotein substrates identified in KB-3-1 adenocarcinoma cell line, qHTS therapeutic library screen 31515284
C2C12 Function assay 0.1 uM Inhibition of ALK5 in mouse C2C12 cells assessed as decrease in TGFbeta1-induced Smad1/5 phosphorylation at 0.1 uM by Western blot method 28103025
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 406.48 Formule

C25H22N6

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1062368-24-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen DM3189 Smiles C1CN(CCN1)C2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC6=CC=CC=C56)N=C3

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

0.01M HCl : 2.5 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ALK1
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK2
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK3
(Cell-free assay)
5.3 nM
ALK6
(Cell-free assay)
16.7 nM
In vitro

LDN-193189 remt potent de BMP4-gemedieerde Smad1-, Smad5- en Smad8-activatie met een IC50 van 5 nM, en remt efficiënt de transcriptionele activiteit van de BMP type I-receptoren ALK2 en ALK3 met respectievelijk een IC50 van 5 nM en 30 nM. Bovendien toont deze verbinding ook een remmend effect op de transcriptionele activiteit die wordt geïnduceerd door constitutief actieve ALK2R206H of ALK2Q207D mutante eiwitten.

Een recente studie toont aan dat deze chemische stof de productie van reactieve zuurstofsoorten blokkeert, geïnduceerd door geoxideerd LDL tijdens atherogenese in humane aorta-endotheelcellen.

Kinase Assay
Alkalische fosfatase-activiteit
C2C12-cellen worden gezaaid in 96-wells platen met 2.000 cellen per well in DMEM aangevuld met 2% FBS. De wells worden in viervoud behandeld met BMP-liganden en LDN-193189 of vehiculum. De cellen worden na 6 dagen kweek verzameld in 50 μL Tris-gebufferde zoutoplossing en 1% Triton X-100. De lysaten worden gedurende 1 uur toegevoegd aan p-nitro-fenylfosfaatreagens in 96-wells platen en vervolgens wordt de alkalische fosfatase-activiteit (absorptie bij 405 nm) geëvalueerd. De celviabiliteit en -kwantiteit worden gemeten met Cell Titer Aqueous One (absorptie bij 490 nm), met behulp van replicate wells die identiek zijn behandeld als die welke werden gebruikt voor de alkalische fosfatase-metingen.
In vivo

Bij conditionele caALK2-transgene muizen met Ad.Cre op postnatale dag 7 (P7) leidt LDN-193189 (3 mg/kg i.p) tot milde verkalkingen rond de linker tibia en fibula, voor het eerst zichtbaar op P13, en voorkomt radiografische laesies op P15 zonder gewichtsverlies of groeivertraging, spontane fracturen, verminderde botdichtheid of gedragsafwijkingen te veroorzaken.

Deze verbinding dorsaliseert zebravissenembryo's door signaleringsroutes te remmen die worden geïnduceerd door botmorfogenetisch eiwit (BMP)6 zonder effect op de vasculaire ontwikkeling.

Bij PCa-118b-tumordragende muizen vermindert deze chemische behandeling de tumorgroei en de botvorming in de tumoren.

Bij LDL-receptor-deficiënte (LDLR-/-) muizen remt dit middel de ontwikkeling van atheroom krachtig. Bovendien vertoont het ook remmende effecten op geassocieerde vasculaire ontsteking, osteogene activiteit en calcificatie.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22223731/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23646137/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot pSMAD1 / pSMAD5 / pSMAD8 / SMAD1 / SMAD5 / SMAD8 / ID1 / SMAD4 / PARP / Cleaved PARP
S2618-WB1
31098401
Immunofluorescence Tbx18 / Hcn4
S2618-IF1
30906456
Growth inhibition assay Cell viability
S2618-viability1
31098401