Home MAPK JNK Remmer JNK-IN-8

alleen voor onderzoeksdoeleinden

JNK-IN-8 JNK Remmer

Cat.nr.: S4901

JNK-IN-8 (JNK Inhibitor XVI) is de eerste irreversibele JNK-remmer voor JNK1, JNK2 en JNK3 met een IC50 van 4,7 nM, 18,7 nM en 1 nM, >10-voudige selectiviteit tegen MNK2, Fms en geen remming van c-Kit, Met, PDGFRβ in A375-cellijnen.
JNK-IN-8 JNK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 507.59

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.16%
99.16

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human HeLa cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human HeLa cells after 1 hr incubation, IC50=0.486 μM 25415535
human A375 cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human A375 cells after 1 hr incubation, IC50=0.338 μM 25415535
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 507.59 Formule

C29H29N7O2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1410880-22-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen JNK Inhibitor XVI Smiles CC1=C(C=CC(=C1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)NC(=O)C=CCN(C)C)NC3=NC=CC(=N3)C4=CN=CC=C4

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (197.0 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Kenmerken
JNK-IN-8 and JNK-IN-7 are structurally very similar, but whereas the former is a specific covalent inhibitor of JNKs.
Targets/IC50/Ki
JNK3
(A375 cells)
1 nM
JNK1
(A375 cells)
4.7 nM
JNK2
(A375 cells)
18.7 nM
Kit (V559D,T670I)
(A375 cells)
56 nM
Kit (V559D)
(A375 cells)
92 nM
In vitro

JNK-IN-8 inhibits c-Jun phosphorylation in HeLa and A375 cells with EC50 of 486 nM and 338 nM, respectively. This compound shows a dramatic improvement in selectivity and eliminated binding to IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C, and PIP5K3. It requires Cys116 for JNK2 inhibition.

This chemical (10 mM) suppresses the IL-1β-stimulated phosphorylation of c-Jun in IL-1R cells, an established substrate of the JNKs. It covalently attaches to the JNK isoforms caused a small retardation in the electrophoretic mobility of the JNK isoforms.

It is discovered to inhibit JNK kinase by broad-based kinase selectivity profiling of a library of acrylamide kinase inhibitors based on the structure of using the KinomeScan approach. This compound possesses distinct regiochemistry of the 1,4-dianiline and 1,3-aminobenzoic acid substructures. It adopts an L-shaped type I binding conformation to access Cys 154 located toward the lip of the ATP-binding site.

Kinase Assay
Bindingskinetiek-assay
Bindingskinetiek-assay A375-cellen worden voorbehandeld met 1 μM JNK-IN-8 gedurende de aangegeven tijdsduur. Verwijder het medium en was driemaal met PBS. Resuspendeer de celpellet met 1 ml lysisbuffer (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, fosfatase-remmercocktail en protease-remmercocktail). Roteer van boven naar beneden gedurende 30 min bij 4℃. Lysaten worden geklaard door centrifugeren bij 1,4×104 tpm gedurende 15 min in de Eppendorf. De geklaarde lysaten worden via 10DG-kolommen in kinasebuffer (0,1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, fosfatase-remmercocktail, protease-remmercocktail) gefiltreerd. De totale eiwitconcentratie van het gelfiltreerde lysaat moet ongeveer 5–15 mg/ml zijn. Cellysaat wordt gedurende 1 uur met de probe van ActivX gelabeld bij 5 μM. Monsters worden gereduceerd met DTT en cysteïnen worden geblokkeerd met iodoacetamide en gelfiltreerd om overtollige reagentia te verwijderen en de buffer uit te wisselen. Voeg 1 vol van 2× bindingsbuffer (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) en 50 μL streptavidine-parelsuspensie toe en roteer van boven naar beneden gedurende 2 uur, centrifugeer bij 7.000 tpm gedurende 2 min. Was driemaal met 1× bindingsbuffer en driemaal met PBS. Voeg 30 μL 1× monstervloeistof toe aan de parels; verwarm monsters gedurende 10 min bij 95℃. Voer monsters uit op een SDS-PAGE-gel bij 110V. Na transfer wordt het membraan geïmmunoblott met JNK-antilichaam.
In vivo

JNK-IN-8 is a potent JNK inhibitor that specially targets JNK activation. It has anti-fungal activity.
Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28112734/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot c-Jun / p-c-Jun / ATF2 / p-ATF2 / Elk-1 / pElk-1 Notch1 / c-Myc / Cyclin D1 / p21
S4901-WB1
27941886
Growth inhibition assay Cell viability
S4901-viability1
25847947