Home Autophagy Autophagy Remmer HCQ (Hydroxychloroquine) Sulfate

alleen voor onderzoeksdoeleinden

HCQ (Hydroxychloroquine) Sulfate Autophagy Remmer

Cat.nr.S4430

Hydroxychloroquine (HCQ) Sulfate is een antimalariamiddel dat wordt gebruikt voor de behandeling van systemische lupus erythematosus, reumatoïde artritis en andere auto-immune, inflammatoire en dermatologische aandoeningen. Werkt ook als een remmer van Autophagy en toll-like receptor (TLR) 7/9.
HCQ (Hydroxychloroquine) Sulfate Autophagy Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 433.95

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.86%
99.86

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
Function assay HEK-Blue cells Antagonist activity at human TLR9 expressed in HEK-Blue cells assessed as reduction in CpGB-induced NF-kappaB levels after 24 hrs by spectrophotometric analysis, IC50 = 0.11 μM. 30292896
Antiviral assay Vero E6 cells 48 h IC50 for antiviral activity against SARS-CoV-2 in the Vero E6 cell line at 48 h by immunofluorescence-based assay (detecting the viral NP protein in the nucleus of the Vero E6 cells)., IC50 = 0.67608 μM. 32353859
Function assay HEK-Blue cells Antagonist activity at human TLR7 expressed in HEK-Blue cells assessed as reduction in CL264-induced NF-kappaB levels after 24 hrs by spectrophotometric analysis, IC50 = 0.8 μM. 30292896
Function assay HEK293 cells hERG binding assays: Displacement of [3H]-Dofetilide (5 nM final) from hERG membranes obtained from HEK293 cells, Ki = 2.51189 μM. 32353859
Antiviral assay Vero E6 cells IC90 for antiviral activity against SARS-CoV-2 in the Vero E6 cell line by measuring infectious viral titer of supernatent from compound-treated Vero E6 cells by Median Tissue Culture Infectious Dose (TCID)50 by the method of Reed and Muench, IC90 = 5.78 μM. 32353859
Antiproliferative assay BxPC3 cells 72 hrs Antiproliferative activity against human BxPC3 cells after 72 hrs by SRB method, IC50 = 33 μM. 25699157
qHTS assay A673 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
qHTS assay BT-37 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
qHTS assay SK-N-MC cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
qHTS assay NB-EBc1 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
qHTS assay LAN-5 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Antiproliferative assay A549 cells 25 ug/ml 20 hrs Antiproliferative activity in human A549 cells at 25 ug/ml up to 20 hrs by xCELLigence RTCA SP based cellular impedance analysis 28570977
Antiproliferative assay A549 cells 25 ug/ml 60 hrs Antiproliferative activity in human A549 cells at 25 ug/ml after 60 hrs by xCELLigence RTCA SP based cellular impedance analysis 28570977
Autophagy assay NCI-H3122 cells 25 to 50 uM 6 hrs Inhibition of autophagy in human NCI-H3122 cells assessed as increase in punctate LC3 expression at 25 to 50 uM after 6 hrs by fluorescence microscopic analysis 25699157
Apoptosis assay H460 cells 25 to 75 uM 24 hrs Induction of apoptosis in human H460 cells at 25 to 75 uM after 24 hrs by annexin-V staining-based flow cytometry 25699157
Autophagy assay H460 cells 24 hrs Inhibition of autophagy in human H460 cells assessed as increase in LC3-2 level at IC50 after 24 hrs by immunoblot analysis 25699157
Antiviral assay Vero E6 cells 2 days Antiviral efficacy against SARS-CoV-2 (strain BavPat1) in Vero E6 cells assessed by inhibition of viral RNA replication measured by RT-PCR after 2 days, EC50 = 4.17 μM. ChEMBL
Antiviral assay Vero E6 cells 3 days IC50 determination at MOI 0.004 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in SARS-CoV-2 infected Vero E6 cells, IC50 = 9.21 μM. ChEMBL
Antiviral assay Vero E6 cells 3 days IC50 determination at MOI 0.01 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in SARS-CoV-2 infected Vero E6 cells, IC50 = 11.17 μM. ChEMBL
Antiviral assay Vero E6 cells 2 days Antiviral efficacy against SARS-CoV-2 (strain BavPat1) in Vero E6 cells assessed by inhibition of viral RNA replication measured by RT-PCR after 2 days, EC90 = 25.49 μM. ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 433.95 Formule

C18H28ClN3O5S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 747-36-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen NSC 4375 Smiles CCN(CCCC(C)NC1=C2C=CC(=CC2=NC=C1)Cl)CCO.OS(=O)(=O)O

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

Water : 87 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TLR9
Autophagy
In vitro

Hydroxychloroquine Sulfate is een krachtige remmer van Autophagy. Het voorkomt lysosomale verzuring, waardoor een cruciale stap in het autofagische proces wordt verstoord. HCQ-behandeling remt de groei van RCC-cellen (niercelkanker), bevordert apoptose, remt mitochondriaal zuurstofverbruik en verhoogt de glycolsnelheid.
Kinase Assay
In vitro kinase assays
met gezuiverde eiwitten, recombinant S6-eiwit en recombinant actief P70S6K worden geïncubeerd in 1x kinasebuffer met verschillende hoeveelheden HCQ of RAD001 in aanwezigheid (25 μM) of afwezigheid van ATP gedurende 30 minuten bij 30°C. Totaal en gefosforyleerd S6 op ser235/236 en ser240/244 worden gedetecteerd door westernanalyse met fosfospecifieke antilichamen. Merk op dat recombinant GST-gelabeld S6 (53 kd) wordt onderscheiden van endogeen S6 (32 kd) op de western blot.
In vivo

De behandeling met Hydroxychloroquine Sulfate vermindert de infarctgrootte in een in vivo ratmodel van I/R-letsel en het cardioprotectieve effect van Hydroxychloroquine is ERK1/2-afhankelijk.

Bovendien vertoont Hydroxychloroquine Sulfate een vroeg vasculair beschermend effect. HCQ lijkt het optreden van endotheeldisfunctie (ED) bij behandelde dieren te voorkomen.
Referenties
  • [4] http://acrabstracts.org/abstract/effects-of-in-vivo-treatment-with-hydroxychloroquine-on-endothelial-function-in-a-murine-model-of-systemic-lupus-erythematosus/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24342772/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot NOX2 / β-actin p-NF-κB / β-actin NLRP3 / β-actin p62 / LC3-I / LC3-II / GAPDH
S4430-WB-1
32260307
IHC HE staining of spleen tissue
S4430-IHC-2
29456648
Immunofluorescence ZO-1
S4430-IF-1
32260307

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT06408298 Not yet recruiting
Resectable Localized Prostate Cancer
Lionel.D.Lewis MD|Dartmouth Cancer Center|Dartmouth-Hitchcock Medical Center
 June 2024 Early Phase 1
NCT05841758 Not yet recruiting
Sarcoidosis Pulmonary
Hospices Civils de Lyon
 April 1 2024 Phase 4
NCT04731051 Withdrawn
2019 Novel Coronavirus
King Hussein Cancer Center|Amman Pharmaceutical Industries (API)|Sana Pharmaceutical Industry|ACDIMA Biocenter
 October 2022 Phase 1|Phase 2
NCT05733897 Recruiting
Nonalcoholic Steatohepatitis
National Taiwan University Hospital|National Taiwan University
 June 10 2022 --
NCT05237843 Unknown status
Recurrent Pregnancy Loss
Ain Shams University
 March 1 2022 Phase 1