Home Protein Tyrosine Kinase CSF-1R Remmer GW2580

alleen voor onderzoeksdoeleinden

GW2580 CSF-1R Remmer

Cat.nr.S8042

GW2580 (SC-203877) is een selectieve CSF-1R-remmer voor c-FMS met een IC50 van 30 nM, 150- tot 500-voudig selectiever vergeleken met b-Raf, CDK4, c-KIT, c-SRC, EGFR, ERBB2/4, ERK2, FLT-3, GSK3, ITK, JAK2 etc.
GW2580 CSF-1R Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 366.41

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HUVEC Growth inhibition assay Growth inhibition of VEGF-stimulated HUVEC after 3 days by spectrophotometry
mouse NSO cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated mouse NSO cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=13.5 μM
human BT474 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human BT474 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=21 μM
human HN5 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human HN5 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=29 μM
human PBMC Function assay Inhibition of LPS-induced IL6 production in human PBMC by ELISA, EC50=1.89 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 366.41 Formule

C20H22N4O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 870483-87-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen SC-203877 Smiles COC1=CC=C(C=C1)COC2=C(C=C(C=C2)CC3=CN=C(N=C3N)N)OC

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 56 mg/mL (152.83 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
c-Fms
30 nM
In vitro
GW2580 remt de humane cFMS-kinase in vitro volledig bij 0,06 μM. Deze verbinding remt de groei van CSF-1-gestimuleerde M-NFS-60 myeloïde tumorcellen, serum-gestimuleerde NSO myeloïde tumorcellen, CSF-1-gestimuleerde vers geïsoleerde humane monocyten en VEGF-gestimuleerde humane navelstrengader-endotheelcellen met een IC50 van respectievelijk 0,33, 13,5, 0,47 en 12 μM. 1 μM van deze chemische stof remt de CSF-1-geïnduceerde groei van muizen M-NFS-60 myeloïde cellen en humane monocyten volledig en remt de botafbraak in culturen van humane osteoclasten, rattencalvaria en rattenfoetale lange botten volledig. Het remt CSF1R-fosforylatie in RAW264.7 muizenmacrofagen gestimuleerd met 10 ng/mL met een IC50 van ongeveer 10 nM. Deze verbinding remt ook TRKA-activiteit met een IC50 van 0,88 μM.
Kinase Assay
cFMS tyrosinekinase-assay
Het enzym wordt geactiveerd door autofosforylering door 10 μM enzym, 100 μM ATP en 5 mM MgCl2 te incuberen in 50 mM Tris HCL gedurende 90 min bij kamertemperatuur. Enzymreacties worden uitgevoerd in een volume van 45 μL, met behulp van ronde-bodem polystyreen 96-wells platen op een Biomek 2000. Dit compound in 1 μL DMSO of DMSO alleen wordt toegevoegd aan elke put met 30 μL van een 1.5× substraatreactiemengsel dat 50 mM Mops (3-[N-Morpholino]propaansulfonzuur), pH 7.5, 15 mM MgCl2, 6 μM peptide substraat, biotine-EAIYAPFAKKK-NH2 7.5 mM DTT, 75 mM NaCl, 10 μM ATP, en 0.5 μCi (1 Ci = 37 GBq) [33P-γ] ATP per assay bevat. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van 15 μL verdunde enzymoplossing, resulterend in een uiteindelijke enzymconcentratie van 20 nM. EDTA wordt toegevoegd aan controleputten voor de bepaling van de achtergrond. De reactie mag 40 min doorgaan en wordt gestopt door de toevoeging van een gelijk volume van 0.5% fosforzuur, en 75 μL wordt overgebracht naar een 96-wells fosfocellulose filterplaat die is voorbevochtigd met 100 μL van 0.5% fosforzuur. De plaat wordt gefilterd op een Millipore filterplaat vacuüm verdeelstuk en drie keer gewassen met de fosforzuuroplossing, gevolgd door de toevoeging van 40 μL scintillatieoplossing. De platen worden verzegeld en geteld in een Packard Topcount NXT scintillatieteller.
In vivo
GW2580 (oraal toegediend met 40 mg/kg 0,5 uur vóór de CSF-1-primingdosis) blokkeert het vermogen van exogeen CSF-1 om de LPS-geïnduceerde TNF-α-productie bij muizen met 63% te verhogen. Wanneer aan muizen vóór CSF-1-priming wordt gegeven, blokkeert dit middel volledig het vermogen van CSF-1 om de muis te primen voor een verhoogde IL-6-productie. Dit chemische middel (80 mg/kg p.o.) remt de groei van CSF-1-afhankelijke M-NFS-60 tumorcellen in de peritoneale holte volledig. Het (80 mg/kg) tweemaal daags oraal toegediend in de week vóór de thioglycolaatinjectie en gedurende de 4-daagse periode ná de thioglycolaatinjectie, vermindert de accumulatie van macrofagen in de peritoneale holte na thioglycolaatinjectie (met 45%). In een 21-daags adjuvansartritismodel remt dit middel (50 mg/kg) tweemaal daags toegediend van dag 0 tot 21, 7 tot 21 of 14 tot 21 de vernietiging van gewrichtsbindweefsel en bot. Dit chemische middel (160 mg/kg) induceert een meer dan 2-voudige reductie van totale CD45+ CD11b+ myeloïde cellen, CD11b+ F4/80+ TAM's en CD11b+ Gr-1+ MDSC's in geïmplanteerde 3LL longtumoren, door tumorrecrutering van myeloïde cellen uit perifeer bloed te remmen. De behandeling met dit middel (80 mg/kg) kan de expressie van Vegf-a (met 35%) en Mmp9 (met 70%) onderdrukken, evenals de tumovasculaire dichtheid (CD31-kleuring). Combinatietherapie met dit middel en een anti-VEGFR-2-antilichaam resulteert in synergetische tumorgerichte groei. DC101 alleen vermindert de tumorgroei met 35%, de combinatie van DC101 en dit chemische middel resulteert in een duidelijke synergetische tumorgerichte groei van ongeveer 70%.
Referenties

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
How to reconstitute it for i.p. injection in mice?

Antwoord:
It can be dissolved in 5% DMSO/30% PEG 300/5% Tween 80/ddH2O at 5 mg/ml clearly. When preparing this kind of vehicle, please dissolve it in DMSO clearly first, then add PEG and Tween. After they are mixed homogeneously, dilute with water.