Home Protein Tyrosine Kinase CSF-1R Remmer GW2580

alleen voor onderzoeksdoeleinden

GW2580 CSF-1R Remmer

Cat.nr.: S8042

GW2580 (SC-203877) is een selectieve CSF-1R-remmer voor c-FMS met een IC50 van 30 nM, 150- tot 500-voudig selectiever vergeleken met b-Raf, CDK4, c-KIT, c-SRC, EGFR, ERBB2/4, ERK2, FLT-3, GSK3, ITK, JAK2 etc.
GW2580 CSF-1R Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 366.41

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HUVEC Growth inhibition assay Growth inhibition of VEGF-stimulated HUVEC after 3 days by spectrophotometry
mouse NSO cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated mouse NSO cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=13.5 μM
human BT474 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human BT474 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=21 μM
human HN5 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human HN5 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=29 μM
human PBMC Function assay Inhibition of LPS-induced IL6 production in human PBMC by ELISA, EC50=1.89 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 366.41 Formule

C20H22N4O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 870483-87-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen SC-203877 Smiles COC1=CC=C(C=C1)COC2=C(C=C(C=C2)CC3=CN=C(N=C3N)N)OC

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 56 mg/mL (152.83 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
c-Fms
30 nM
In vitro
GW2580 completely inhibits human cFMS kinase in vitro at 0.06 μM. This compound inhibits the growth of CSF-1 stimulated M-NFS-60 myeloid tumor cells, serum stimulated NSO myeloid tumor cells, CSF-1 stimulated freshly isolated human monocytes, and VEGF stimulated human umbilical vein vascular endothelial cells with IC50 of 0.33, 13.5, 0.47 and 12 μM, respectively. 1 μM of this chemical completely inhibits CSF-1-induced growth of mouse M-NFS-60 myeloid cells and human monocytes and completely inhibits bone degradation in cultures of human osteoclasts, rat calvaria, and rat fetal long bone. It inhibits CSF1R phosphorylation in RAW264.7 murine macrophages stimulated with 10 ng/mL with IC50 of approximately 10 nM. This compound also inhibits TRKA activity with IC50 of 0.88 μM.
Kinase Assay
cFMS tyrosine kinase assay
Het enzym wordt geactiveerd door autofosforylering door 10 μM enzym, 100 μM ATP en 5 mM MgCl2 in 50 mM Tris HCl gedurende 90 min op kamertemperatuur te incuberen. Enzymreacties worden uitgevoerd in een volume van 45 μL, met behulp van 96-well polystyreenplaten met ronde bodem op een Biomek 2000. Deze verbinding in 1 μL DMSO of DMSO alleen worden toegevoegd aan elke well die 30 μL van een 1,5× substraat-reactiemix bevat met 50 mM Mops (3-[N-morfolino]propaansulfonzuur), pH 7,5, 15 mM MgCl2, 6 μM peptidesubstraat, biotine-EAIYAPFAKKK-NH2, 7,5 mM DTT, 75 mM NaCl, 10 μM ATP en 0,5 μCi (1 Ci = 37 GBq) [33P-γ] ATP per assay. De reactie wordt gestart door de toevoeging van 15 μL verdunde enzymoplossing, wat resulteert in een uiteindelijke enzymconcentratie van 20 nM. EDTA wordt toegevoegd aan controle-wells voor de bepaling van de achtergrond. De reactie wordt 40 min laten doorgaan en gestopt door de toevoeging van een gelijk volume van 0,5% fosforzuur, en 75 μL wordt overgebracht naar een 96-well fosfocellulose-filterplaat die is voorbevochtigd met 100 μL van 0,5% fosforzuur. De plaat wordt gefilterd op een Millipore filterplaat-vacuümmanifold en drie keer gewassen met de fosforzuuroplossing, gevolgd door de toevoeging van 40 μL scintillatievloeistof. De platen worden verzegeld en geteld in een Packard Topcount NXT scintillatieteller.
In vivo
GW2580 (dosed orally at 40 mg/kg 0.5 h before the CSF-1-priming dose) blocks the ability of exogenous CSF-1 to increase LPS-induced TNF-α production in mice by 63%. When given to mice before CSF-1 priming, this compound completely blocks the ability of CSF-1 to prime the mouse for increased IL-6 production. This chemical (80 mg/kg p.o.) completely inhibits the growth of CSF-1-dependent M-NFS-60 tumor cells in the peritoneal cavity. It (80 mg/kg) dosed orally twice a day the week before thioglycolate injection and for the 4-day period after thioglycolate injection, diminishes the accumulation of macrophages in the peritoneal cavity after thioglycolate injection (by 45%). In a 21-day adjuvant arthritis model, this compound (50 mg/kg) dosed twice a day from days 0 to 21, 7 to 21, or 14 to 21 inhibits joint connective tissue and bone destruction. This chemical (160 mg/kg) induces a more than 2-fold reduction of total CD45+ CD11b+ myeloid cells, CD11b+ F4/80+ TAMs, and CD11b+ Gr-1+ MDSCs in implanted 3LL lung tumor, through inhibiting tumor recruitment of myeloid cells from peripheral blood. It (80 mg/kg) treatment is able to suppress Vegf-a (by 35%) and Mmp9 (by 70%) expression, as well as tumor vascular density (CD31 staining). Combination therapy with this compound and an anti-VEGFR-2 antibody results in synergistic tumor growth reduction. DC101 alone reduces tumor growth by 35%, the combination of DC101 and this chemical results in an apparent synergistic tumor growth reduction of approximately 70%.
Referenties

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
How to reconstitute it for i.p. injection in mice?

Antwoord:
It can be dissolved in 5% DMSO/30% PEG 300/5% Tween 80/ddH2O at 5 mg/ml clearly. When preparing this kind of vehicle, please dissolve it in DMSO clearly first, then add PEG and Tween. After they are mixed homogeneously, dilute with water.