Home Epigenetics EZH2 Remmer GSK126

alleen voor onderzoeksdoeleinden

GSK126 EZH2-remmer

Cat.nr.S7061

GSK126 (GSK2816126A, GSK2816126) is een krachtige, zeer selectieve EZH2 methyltransferase remmer met een IC50 van 9,9 nM, >1000-voudig selectief voor EZH2 boven 20 andere menselijke methyltransferasen.
GSK126 EZH2 Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 526.67

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.91%
99.91

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human U87MG cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human U87MG cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=28.5 μM. 24767850
human A549 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human A549 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=18.7 μM. 24767850
human T98G cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human T98G cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=12.6 μM. 24767850
human Daudi cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human Daudi cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=11.2 μM. 24767850
human PC3 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human PC3 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=9.4 μM. 24767850
human U2932 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human U2932 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=6.7 μM. 24767850
human HeLa cells Function assay 72 h Inhibition of EZH2 in human HeLa cells assessed as reduction in H3K27me3 levels incubated for 72 hrs by ELISA method, IC50=0.28 μM. 26189078
human Pfeiffer cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human Pfeiffer cells expressing EZH2 A667G mutant assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=0.18 μM. 24767850
infected SF9 cells Binding affinity to EZH2 (unknown origin) expressed in baculovirus infected SF9 cells co-expressing SUZ12/EED/RbAp48 complex assessed as binding off-rate at 0.4 uM incubated for 20 mins by Q-TOF mass spectrometry 27512831
A673 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
SK-N-MC cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
LAN-5 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 526.67 Formule

C31H38N6O2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1346574-57-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen GSK2816126A, GSK2816126 Smiles CCC(C)N1C=C(C2=C(C=C(C=C21)C3=CN=C(C=C3)N4CCNCC4)C(=O)NCC5=C(C=C(NC5=O)C)C)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 5 mg/mL (9.49 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 4 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
EZH2
(Cell-free assay)
9.9 nM
In vitro
In vitro remt GSK126 het meest potent H3K27me3, gevolgd door H3K27me2 in zowel EZH2 wild-type als mutante DLBCL-cellijnen. Deze verbinding remt ook effectief de proliferatie van EZH2-mutante DLBCL-cellijnen, en induceert transcriptionele activering van EZH2-doelgenen in gevoelige cellijnen. In A687V EZH2-mutante cellen resulteert deze behandeling in een globale afname van H3K27me3, robuuste genactivatie, caspase-activering en verminderde proliferatie. In parenterale H2087-cellen remt het de expressie van VEGF-A en gefosforyleerde Ser(473)-AKT, en veroorzaakt zo de remming van celproliferatie, migratie en metastase.
Kinase Assay
EZH2-analyse
Het vijfdelige PRC2-complex (Flag–EZH2, EED, SUZ12, AEBP2, RbAp48) dat wild-type of mutant EZH2 bevat, wordt bereid. GSK126 wordt opgelost in DMSO en getest bij concentraties van 0,6 nM tot 300 nM met een uiteindelijke DMSO-concentratie van 2,5%. In tegenstelling tot wild-type EZH2, dat in vitro H3K27me0 als substraat prefereert, prefereren EZH2 Y641-mutanten H3K27me2 en hebben ze weinig activiteit met H3K27me0 of H3K27me1. De A677G-mutant onderscheidt zich van zowel de wild-type als de Y641-mutante vormen van EZH2 doordat het H3K27me0, H3K27me1 en H3K27me2 efficiënt methylatieert; daarom worden histone H3-peptiden (residuen 21–44; 10 μM finaal) met K27me0 (wild type, A677G EZH2), K27me1 (A677G EZH2) of K27me2 (A677G, Y641N, Y641C, Y641H, Y641S en Y641F EZH2) gebruikt als methyltransferase-substraten. Deze verbinding wordt aan platen toegevoegd, gevolgd door toevoeging van 6 nM EZH2-complex en peptide. Aangezien de potentie van deze chemische stof op of nabij de strakke bindingsgrens ligt van een assay die wordt uitgevoerd bij [SAM] = Km, worden IC50-waarden gemeten bij een hoge concentratie van het competitieve substraat SAM ten opzichte van zijn Km (7,5 μM SAM waarbij de SAM Km 0,3 μM is). Onder deze omstandigheden wordt de bijdrage van de enzymconcentratie relatief klein en kunnen nauwkeurige schattingen van Ki worden berekend. Reacties worden geïnitieerd met [3H]-SAM, geïncubeerd gedurende 30 min, afgevlakt met de toevoeging van 500-voudig overschot ongelabelde SAM, en het gemethyleerde productpeptide wordt opgevangen op fosfocellulosefilters volgens het door de leverancier geleverde protocol voor MSPH Multiscreen-platen. Platen worden afgelezen op een TopCount na toevoeging van 20 μL Microscint-20 cocktail. Apparente Ki-waarden worden berekend met behulp van de Cheng–Prusoff-relatie voor een competitieve remmer. IC50=Ki (1+[S]/Km)+[E]/2, waarbij E het enzym en S het substraat is.
In vivo
Bij muizen met KARPAS-422 en Pfeiffer xenografts, vermindert GSK126 (150 mg/kg/d, i.p.) de globale H3K27me3, verhoogt de genexpressie en veroorzaakt zo een duidelijke tumorregressie.
Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot H3K27Me3 / EZH2 XIAP / Survivin / MCL-1 / BID / BIM / BAX / BCL-xl/ Bcl-2 β-catenin / c-Myc / LEF1 / DVL2 / DVL3 / p-GSK3β
S7061-WB1
28418882
Immunofluorescence H3K27me3
S7061-IF1
25053977
Growth inhibition assay Cell viability Cell proliferation
S7061-viability
28418882

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT02082977 Terminated
Cancer|Neoplasms
GlaxoSmithKline
 April 24 2014 Phase 1

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
Could you please suggest a vehicle for in vivo uses of this compound without oil?

Antwoord:
It could be dissolved in 4% DMSO+30% PEG 300+ddH2O (0.5mg/ml).

Vraag 2:
Does this compound require an activation step to be functional? For example, an acidic or basic environment.

Antwoord:
It does not require an activation step to be functional.