alleen voor onderzoeksdoeleinden

Alectinib (CH5424802) ALK Remmer

Name: Alectinib (CH5424802)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2762
Rating: 5 (104 reviews)

Cat.nr.S2762

Alectinib is een potente ALK-remmer met een IC50 van 1,9 nM in celvrije assays, gevoelig voor de L1196M-mutatie en met een hogere selectiviteit voor ALK dan PF-02341066, NVP-TAE684 en PHA-E429.

Alectinib (CH5424802) ALK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 482.62

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.95%

99.95

Gerelateerde doelwitten	EGFR VEGFR PDGFR FGFR c-Met Src MEK CSF-1R FLT3 HER2
Overig ALK Inhibitoren	TAE684 (NVP-TAE684) GSK1838705A Repotrectinib (TPX-0005) AZD3463 Ensartinib dihydrochloride AP26113-analog (ALK-IN-1) ASP3026 NVL-655 (Neladalkib) Envonalkib Belizatinib (TSR-011)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
NCI-H2228	Kinase assay	~1 μM			prevents autophosphorylation of ALK	21575866
KARPAS-299	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=3 nM	21575866
SR	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=6.9 nM	21575866
HDLM-2	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
NB-1	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=4.5 nM	21575866
KELLY	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=62 nM	21575866
SK-N-FI	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
NCI-H2228	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=53 nM	21575866
Calu-3	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=>10,000 nM	21575866
PC-1	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
NCI-H23	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=3600 nM	21575866
Calu-1	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
NCI-H2009	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
NCI-H1993	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
MKN-45	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
SNU-5	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=1800 nM	21575866
KATO-III	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=7900 nM	21575866
SK-BR-3	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
BT-483	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
PC-3	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
22Rv1	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
U-87 MG	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50>10,000 nM	21575866
H3122	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=33 nM	25096400
LC-2/ad	Apoptosis assay	~1 μM		DMSO	induces apoptosis	25349307
LC-2/ad	Function assay	~1 μM		DMSO	inhibits the MAPK signaling pathway	25349307
Ba/F3	Function assay	~1 μM		DMSO	suppresses phosphorylation of ERK and increases the abundance of BIM	25349307
SNU-2535	Growth inhibitory assay	~10 μM			IC50=33.1 nM	26849637
SNU-2535	Kinase assay	~1 μM			inhibits the phosphorylation of ALK and its downstream molecules ERK1/2 and AKT	26849637
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK C1156Y mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.002 μM.	26568289
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK S1206Y mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.002 μM.	26568289
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of wild type EML4-ALK (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.002 μM.	26568289
KARPAS299	Antiproliferative assay		96 hrs		Antiproliferative activity against human KARPAS299 cells after 96 hrs by cell counting assay, IC50 = 0.003 μM.	22225917
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK F1174L mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.003 μM.	26568289
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK G1269A mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.009 μM.	26568289
NCI-H3122	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human NCI-H3122 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.009 μM.	26568289
KARPAS299	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human KARPAS299 cells after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.015 μM.	27131066
NCI-H3122	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human NCI-H3122 cells after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.0174 μM.	27131066
SUP-M2	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SUP-M2 cells after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.0179 μM.	27131066
NCI-H3122	Function assay		72 hrs		Inhibition of ALK expressed in human NCI-H3122 cells assessed as cell growth inhibition after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.019 μM.	27131066
NCI-H3122	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against ALK-dependent human NCI-H3122 cells after 72 hrs, IC50 = 0.019 μM.	26476749
SU-DHL1	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SU-DHL1 cells after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.0205 μM.	27131066
NIH/3T3	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against mouse NIH/3T3 cells expressing wild type EML4-ALK after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.0323 μM.	27131066
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK 1151Tins mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.072 μM.	26568289
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK L1196M mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.09 μM.	26568289
NIH/3T3	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against mouse NIH/3T3 cells expressing EML4-ALK L1196 mutant after 72 hrs by SRB/CCK-8 assay, IC50 = 0.132 μM.	27131066
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK L1152R mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.169 μM.	26568289
Ba/F3	Function assay		72 hrs		Inhibition of EML4-ALK G1202R mutant (unknown origin) expressed in mouse Ba/F3 cells assessed as cell viability after 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.207 μM.	26568289
DFCI114	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human DFCI114 cells expressing EML4-ALK G1269A mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.207 μM.	26568289
CHLA20	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human CHLA20 cells expressing EML4-ALK R1275Q mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.43 μM.	26568289
Kelly	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human Kelly cells expressing EML4-ALK F1174L mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.434 μM.	26568289
DFCI76	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human DFCI76 cells expressing EML4-ALK L1152R mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.511 μM.	26568289
LAN5	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human LAN5 cells expressing EML4-ALK R1275Q mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.617 μM.	26568289
SMS-KCNR	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SMS-KCNR cells expressing EML4-ALK R1275Q mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.765 μM.	26568289
SK-N-SH	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SK-N-SH cells expressing EML4-ALK F1174L mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 0.872 μM.	26568289
SH-SY5Y	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SH-SY5Y cells expressing EML4-ALK F1174L mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 1.15 μM.	26568289
SK-N-BE(2)	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SK-N-BE(2) cells expressing wild type EML4-ALK after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 1.554 μM.	26568289
LAN1	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human LAN1 cells expressing EML4-ALK F1174L mutant after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 2.004 μM.	26568289
SK-N-AS	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SK-N-AS cells expressing wild type EML4-ALK after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 2.139 μM.	26568289
SK-N-FI	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human SK-N-FI cells expressing wild type EML4-ALK after 72 hrs by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay, EC50 = 2.401 μM.	26568289
NIH/3T3	Antitumor assay	50 mg/kg	10 days		Antitumor activity against mouse NIH/3T3 cells expressing EML4-ALK L1196M mutant xenografted in nude mouse assessed as tumor stasis at 50 mg/kg, po qd administered for 10 days	27131066
NIH/3T3	Antitumor assay	50 mg/kg	10 days		Antitumor activity against mouse NIH/3T3 cells expressing EML4-ALK L1196M mutant xenografted in nude mouse assessed as partial tumor regression at 50 mg/kg, po qd administered for 10 days	27131066
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht	482.62	Formule	C₃₀H₃₄N₄O₂	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1256580-46-7	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	AF-802, RG-7853,CH5424802			Smiles	CCC1=CC2=C(C=C1N3CCC(CC3)N4CCOCC4)C(C5=C(C2=O)C6=C(N5)C=C(C=C6)C#N)(C)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 7 mg/mL (14.5 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	ALK (F1174L) (Cell-free assay) 1 nM ALK (Cell-free assay) 1.9 nM ALK (R1275Q) (Cell-free assay) 3.5 nM
In vitro	De dissociatieconstante (KD) waarde van CH5424802 voor ALK op een ATP-competitieve manier is 2,4 nM. CH5424802 heeft een aanzienlijke remmende potentie tegen zowel natief ALK als L1196M met K_i van respectievelijk 0,83 nM en 1,56 nM. CH5424802 voorkomt autofosforylering van ALK in NCI-H2228 NSCLC-cellen die EML4-ALK tot expressie brengen. CH5424802 onderdrukt ook de fosforylering van STAT3 en AKT, maar niet die van ERK1/2. CH5424802 remt de fosforylering van STAT3 bij Tyr705 volledig. CH5424802 is bij voorkeur effectief tegen NCI-H2228-cellen die EML4-ALK tot expressie brengen, maar niet tegen ALK-fusie-negatieve NSCLC-cellijnen, waaronder HCC827-cellen (EGFR exon 19 deletie), A549-cellen (KRAS mutant) of NCI-H522-cellen (EGFR wildtype, KRAS wildtype en ALK wildtype) in monolaagcultuur. CH5424802 veroorzaakt een apoptotische marker – caspase-3/7-achtige activering – in NCI-H2228-sferoïdecellen. CH5424802 blokkeert de groei van twee lymfoomlijnen, KARPAS-299 en SR, met NPM-ALK-fusie-eiwit, maar beïnvloedt de groei van een HDLM-2-lymfoomlijn zonder ALK-fusie niet. CH5424802 vertoont een hoge doelselectiviteit en de sterkere anti-proliferatieve activiteit tegen KARPAS-299. CH5424802 remt KAPRAS-299 met een IC50 van 3 nM, en KDR met een IC50 van 1,4 μM. De metabole stabiliteit van CH5424802 is zeer hoog.
Kinase Assay	Kinase-remmingsassays in vitro
Kinase Assay	De remmende capaciteit tegen elke kinase, behalve MEK1 en Raf-1, wordt geëvalueerd door hun vermogen om verschillende substraatpeptiden te fosforyleren in aanwezigheid van CH5424802 met behulp van een tijdopgeloste fluorescentieresonantie-energietransfer (TR-FRET) assay of een fluorescentiepolarisatie (FP) assay. De remmende activiteit tegen MEK1 wordt geëvalueerd door kwantitatieve analyse van de fosforylering van een substraatpeptide door een recombinant ERK2-eiwit in aanwezigheid van CH5424802. De remmende activiteit tegen Raf-1 wordt geëvalueerd door het vermogen van de kinasen te onderzoeken om MEK1 te fosforyleren in aanwezigheid van CH5424802.
In vivo	Orale toediening van CH5424802 remt de tumorgroei dosisafhankelijk met een ED50 van 0,46 mg/kg en veroorzaakt tumorregressie. Behandeling met 20 mg/kg CH5424802 toont een snelle tumorregressie van 168%, het tumorvolume bij elke muis is <30 mm³ na 11 dagen behandeling (op dag 28), een krachtig antitumor effect wordt gehandhaafd, en tumorteruggroei treedt niet op gedurende de 4 weken durende medicatievrije periode. De halfwaardetijd en de orale biologische beschikbaarheid van CH5424802 bij muizen zijn respectievelijk 8,6 uur en 70,8%. Bij een herhaalde dosis van 6 mg/kg bereikten de gemiddelde plasmaspiegels 1,7, 1,5 en 0,3 nM op respectievelijk 2, 7 en 24 uur na toediening. Toediening van CH5424802 leidt tot voorkoming van tumorgroei en tumorregressie. Tumorgroeiremming bij 20 mg/kg is 119% voor KARPAS-299 en 104% voor NB-1 op dag 20. CH5424802 remt de fosforylering van STAT3 op een dosisafhankelijke manier (2-20 mg/kg). Een gedeeltelijke afname van AKT-fosforylering wordt ook waargenomen in met CH5424802 behandelde xenograft-tumoren.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21575866/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22225917/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	pALK / ALK / pAKT / AKT / pERK / ERK / pS6 / S6 PARP / cleaved PARP / Akt / caspase 3 / Cleaved caspase 3 pROS1 / ROS1 / pSTAT3 / STAT3 p-EGFR Tyr1068 / EGFR / p-HER3 Tyr1222 / HER3 / p-IGF-1R Tyr1135 / IGF-1R		25228534
Growth inhibition assay	Cell viability		25228534

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT05987956	Not yet recruiting	Non-small Cell Lung Cancer	Han Xu M.D. Ph.D. FAPCR Sponsor-Investigator IRB Chair\|Medicine Invention Design Inc	March 8 2024	Phase 2\|Phase 3
NCT05987644	Recruiting	Lung Cancer\|NSCLC\|Brain Metastases	Joshua Palmer\|Genentech Inc.\|Hoosier Cancer Research Network	March 7 2024	Phase 1\|Phase 2
NCT05710133	Enrolling by invitation	NSCLC	The Netherlands Cancer Institute	February 1 2024	Not Applicable
NCT05770037	Recruiting	Solid Tumor\|Haematological Malignancy\|Malignant Neoplasm\|Lymphoproliferative Disorders\|Neoplasms by Histologic Type\|Neoplasms by Site\|Cancer\|Anaplastic Large Cell Lymphoma\|Lymphoma\|Renal Cell Carcinoma\|Neuroblastoma	Cancer Research UK\|University of Manchester\|University of Birmingham\|Royal Marsden NHS Foundation Trust\|Hoffmann-La Roche	December 18 2023	Phase 2\|Phase 3
NCT05525338	Recruiting	Drug Monitoring\|Carcinoma Non-Small-Cell Lung\|Lung Cancer\|Anaplastic Lymphoma Kinase Gene Mutation\|Anaplastic Lymphoma Kinase Gene Translocation	University Medical Center Groningen\|Academisch Medisch Centrum - Universiteit van Amsterdam (AMC-UvA)\|Erasmus Medical Center\|Maastricht University Medical Center\|Radboud University Medical Center\|The Netherlands Cancer Institute\|Leiden University Medical Center	March 23 2022	Phase 4
NCT04774718	Recruiting	ALK Fusion-positive Solid or CNS Tumors	Hoffmann-La Roche	September 14 2021	Phase 1\|Phase 2

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):