Home JAK/STAT JAK Remmer Baricitinib (LY3009104)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Baricitinib (LY3009104) JAK Remmer

Cat.nr.S2851

Baricitinib (LY3009104) is een selectieve JAK1- en JAK2-remmer met een IC50 van 5,9 nM en 5,7 nM in celvrije assays, ~70 en ~10-voudig selectief ten opzichte van JAK3 en Tyk2, zonder remming van c-Met en Chk2. Het is gebleken de passage van het virus in doelcellen te verminderen of te onderbreken en wordt gebruikt in het behandelingsonderzoek voor COVID-19. Fase 3.
Baricitinib (LY3009104) JAK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 371.42

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human CD34+ cells Function assay 45 mins Inhibition of JAK2 homodimer in human CD34+ cells spiked into human whole blood assessed as inhibition of EPO-induced STAT-5 phosphorylation preincubated for 45 mins followed by EPO addition measured after 15 mins by FACS analysis, IC50=0.0878μM 24417533
human UT7 cells Function assay Inhibition of JAK2 in human UT7 cells assessed as suppression of EPO-stimulated STAT5 phosphorylation by AlphaScreen assay 26372653
human TF1 cells Function assay Inhibition of JAK1 in human TF1 cells assessed as suppression of IL6-stimulated STAT3 phosphorylation by AlphaScreen assay 26372653
CD34+ Function assay 45 mins Inhibition of JAK2 homodimer in human CD34+ cells spiked into human whole blood assessed as inhibition of EPO-induced STAT-5 phosphorylation preincubated for 45 mins followed by EPO addition measured after 15 mins by FACS analysis, IC50 = 0.0878 μM. 24417533
TF1 Function assay Inhibition of JAK1 in human TF1 cells assessed as suppression of IL6-stimulated STAT3 phosphorylation by AlphaScreen assay, INH = 0.017 μM. 26372653
UT7 Function assay Inhibition of JAK2 in human UT7 cells assessed as suppression of EPO-stimulated STAT5 phosphorylation by AlphaScreen assay, INH = 0.31 μM. 26372653
HeLa Function assay 5 uM 2 hrs Inhibition of IFNgamma-induced JAK2 phosphorylation in human HeLa cells at 5 uM incubated for 2 hrs by Western blot method 27137359
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 371.42 Formule

C16H17N7O2S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1187594-09-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen INCB028050, LY3009104 Smiles CCS(=O)(=O)N1CC(C1)(CC#N)N2C=C(C=N2)C3=C4C=CNC4=NC=N3

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 74 mg/mL (199.23 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
JAK2
(Cell-free assay)
5.7 nM
JAK1
(Cell-free assay)
5.9 nM
TYK2
(Cell-free assay)
53 nM
JAK3
(Cell-free assay)
>400 nM
In vitro

Baricitinib (LY3009104) remt IL-6–gestimuleerde fosforylering van het canonieke substraat STAT3 (pSTAT3) en de daaropvolgende productie van het chemokine MCP-1 met IC50-waarden van respectievelijk 44 nM en 40 nM in PBMC's. Deze verbinding remt ook pSTAT3 gestimuleerd door IL-23 met IC50 van 20 nM in geïsoleerde naïeve T-cellen.

Kinase Assay
Biochemische analyses
Enzymassays voor Baricitinib (LY3009104) worden uitgevoerd met behulp van een homogene tijdopgeloste fluorescentieassay met recombinante epitopen gelabelde kinase domeinen (JAK1, 837-1142; JAK2, 828-1132; JAK3, 718-1124; Tyk2, 873-1187) of full-length enzym (cMET en Chk2) en peptidesubstraat. Elke enzymreactie wordt uitgevoerd met of zonder deze verbinding (11-puntsverdunning), JAK, cMET of Chk2 enzym, 500 nM (100 nM voor Chk2) peptide, ATP (bij de Km specifiek voor elke kinase of 1 mM) en 2,0% DMSO in assaybuffer. De berekende IC50-waarde is de concentratie die nodig is voor inhibitie van 50% van het fluorescentiesignaal.
In vivo

Baricitinib (LY3009104) remt IL-6-gestimuleerde fosforylering van STAT3 in volbloed met een IC50 van 128 nM. Van deze verbinding (10 mg/kg p.o.) wordt verwacht dat het JAK1/2-signalering (met ≥50%) remt bij ratten gedurende ongeveer 8 uur. Het (10 mg/mL, p.o.) remt ziektecores op een dosisafhankelijke manier bij ratten met een vastgestelde ziekte in het adjuvante artritismodel. Deze behandeling, vergeleken met vehiculum, remt de toename van de achterpootvolumes gedurende de 2 weken behandeling met 50% bij een dosis van 1 mg/kg en >95% bij doses van 3 mg/kg of 10 mg/kg. De verbinding, vergeleken met vehiculum, remt ook de samengestelde score van immuuninfiltraat, oedeem en periarticulaire weefselverschijning met 27% bij een dosis van 1 mg/kg, 64% bij doses van 3 mg/kg en 82% bij doses van 10 mg/kg bij ratten met een vastgestelde ziekte in het adjuvante artritismodel. Het vermindert botresorptie met 15%, 61% en 67% met toenemende dosering (1, 3 en 10 mg/kg) bij ratten met een vastgestelde ziekte in het adjuvante artritismodel. Deze chemische stof (10 mg/kg, dagelijks gedurende 2 weken, p.o.) resulteert in radiografische verbeteringen met herstel van de normale architectuur en het uiterlijk van de enkel en tarsalia bij ratten met een vastgestelde ziekte in het adjuvante artritismodel. Het verlaagt de pSTAT3-niveaus op een dosis- en tijdsafhankelijke manier in het perifere bloed van rAIA-dieren. Dit middel (10 mg/mL, p.o.) verbetert een samengestelde score van gewrichtsschade met 47% in het murine CIA-model. Het (10 mg/kg) vermindert pannus (74%) en botschade (78%) en verbetert kraakbeenschade (43%) en tekenen van ontsteking (33%), resulterend in een 53% verbetering in een totale ziektecore in het collageen Ab-geïnduceerde artritis (CAIA) murine model. De verbinding (10 mg/kg) remt de vertraagde type overgevoeligheidsreactie met 48% in zowel de CIA- als CAIA-modellen.

Het is werkzaam bij actieve reumatoïde artritispatiënten die resistent zijn tegen ziekte modulerende geneesmiddelen en biologische middelen.

Het remt bij voorkeur JAK1 en JAK2, met een 10-voudige selectiviteit boven Tyk2 en 100-voudige boven JAK3. De waargenomen effecten van GLPG-0634 op de ACR20, zij het in een kleinere studie, lijken minstens zo goed te zijn als die gezien met tofacitinib en superieur aan die van baricitinib, aangezien deze chemische stof de ACR20-waarden in fase IIa klinische studies slechts matig beïnvloedt.

Het heeft het dosisbeperkende neveneffect van het induceren van anemie, wat is toegeschreven aan de effecten op JAK2, maar heeft duidelijk werkzaamheid getoond.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22812580/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot phSTAT1 / phSTAT3
S2851-WB1
28369741

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT05914584 Not yet recruiting
Hospital-acquired Pneumonia
Nantes University Hospital
 July 1 2023 Phase 2|Phase 3
NCT05189106 Recruiting
Amyotrophic Lateral Sclerosis|Alzheimer Disease|Mild Cognitive Impairment
Massachusetts General Hospital
 December 5 2022 Phase 1|Phase 2
NCT05074420 Recruiting
Covid19|Corona Virus Infection
Eli Lilly and Company
 December 21 2021 Phase 3
NCT04208464 Completed
Idiopathic Inflammatory Myopathies
University of Manchester|Eli Lilly and Company|Clinical Trials Unit Manchester|Karolinska Institutet
 October 7 2021 Phase 2
NCT04358614 Completed
COVID|Pneumonia
Fabrizio Cantini|Hospital of Prato
 March 16 2020 Phase 2|Phase 3

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
Do you know if it will dissolve directly into 0.5% methylcellulose (vehicle for oral gavage treatments) or is acid required to dissolve this compound?

Antwoord:
It can be dissolved directly into 0.5% methylcellulose, as cited from the reference. We also tested dissolving it into 30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol, and the solubility is about 30 mg/mL.