Home Apoptosis IAP Antagonist Xevinapant (AT406)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Xevinapant (AT406) IAP Antagonist

Cat.nr.: S2754

Xevinapant (AT406, ARRY-334543, Debio1143, SM-406) is een potente Smac-mimeticum en een antagonist van IAP (remmer van Apoptosis -eiwit via E3 Ligase ), bindt aan XIAP-BIR3, cIAP1-BIR3 en cIAP2-BIR3 met een Ki van 66,4 nM, 1,9 nM en 5,1 nM, 50- tot 100-voudig hogere affiniteiten dan het Smac AVPI-peptide. Fase 1.
Xevinapant (AT406) IAP Antagonist Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 561.71

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
EVSA-T Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human sensitive EVSA-T cells assessed as inhibition of cell growth after 72 hrs by Alamar Blue assay, EC50 = 0.0021 μM. 26218264
MDA-MB-231 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human sensitive MDA-MB-231 cells assessed as inhibition of cell growth after 72 hrs by Alamar Blue assay, EC50 = 0.019 μM. 26218264
HEK293 Function assay 2 hrs Antagonist activity at full-length FLAG-tagged XIAP (unknown origin) transfected in HEK293 cells assessed as inhibition of interaction with caspase 9 after 2 hrs by immunoprecipitation assay, EC50 = 0.034 μM. 26218264
SKOV3 Growth inhibition assay 4 days Growth inhibition of human SKOV3 cells after 4 days by WST8 assay, IC50 = 0.142 μM. 21443232
MDA-MB-231 Growth inhibition assay 4 days Growth inhibition of human MDA-MB-231 cells after 4 days by WST8 assay, IC50 = 0.144 μM. 21443232
MDA-MB-231 Function assay 10 nM Induction of degradation of cIAP1 in human MDA-MB-231 cells at 10 nM by Western blot analysis 21443232
MDA-MB-231 Function assay 100 nM 15 mins Induction of degradation of cIAP1 in human MDA-MB-231 cells at 100 nM after 15 mins by Western blot analysis 21443232
MDA-MB-231 Apoptosis assay 1.5 uM 12 hrs Induction of apoptosis in human MDA-MB-231 cells assessed as activation of caspase-3 activity at 1.5 uM after 12 hrs by Western blot analysis 21443232
MDA-MB-231 Apoptosis assay 1.5 uM 12 hrs Induction of apoptosis in human MDA-MB-231 cells assessed as activation of PARP cleavage at 1.5 uM after 12 hrs by Western blot analysis 21443232
MDA-MB-231 Antitumor assay 30 mg/kg 2 weeks Antitumor activity against human MDA-MB-231 cells xenografted in SCID mouse assessed inhibition of tumor growth at 30 mg/kg, po administered daily for 5 days/week for 2 weeks 21443232
MDA-MB-231 Antitumor assay 100 mg/kg 2 weeks Antitumor activity against human MDA-MB-231 cells xenografted in SCID mouse assessed inhibition of tumor growth at 100 mg/kg, po administered daily for 5 days/week for 2 weeks 21443232
MDA-MB-231 Antitumor assay 100 mg/kg every 3 days Antitumor activity against human MDA-MB-231 cells xenografted in Balb/c SCID mouse assessed as tumor growth inhibition at 100 mg/kg, po qd measured every 3 days 26218264
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells 29435139
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 561.71 Formule

C32H43N5O4

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1071992-99-8 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen ARRY-334543, Debio1143, SM-406 Smiles CC(C)CC(=O)N1CCC2CCC(N2C(=O)C(C1)NC(=O)C(C)NC)C(=O)NC(C3=CC=CC=C3)C4=CC=CC=C4

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 112 mg/mL (199.39 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 112 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
cIAP1-BIR3
(cell-free assay)
1.9 nM(Ki)
cIAP2-BIR3
(cell-free assay)
5.1 nM(Ki)
XIAP-BIR3
(cell-free assay)
66.4 nM(Ki)
In vitro
AT-406 is a Smac mimetic and appears to mimic closely the AVPI peptide in both hydrogen bonding and hydrophobic interactions with XIAP, with additional hydrophobic contacts with W323 of XIAP. AT-406 is more sensitive to these IAPs than Smac AVPI peptide with 50-100 fold binding affinities. AT-406 (at 1 μM) completely restores the activity of caspase-9, which is suppressed by 500 nM XIAP BIR3 in a cell-free system. In MDA-MB-231 cell, AT-406 induces rapid cellular cIAP1 degradation and also pulls down the cellular XIAP protein. AT-406 effectively inhibits lots of human cancer cell lines and shows IC50 of 144 and 142 nM in MDA-MB-231 cell and SK-OV-3 ovarian cell, with low toxicity against normal-like human breast epithelial MCF-12F cells and primary human normal prostate epithelial cells. AT-406 induces apoptosis in MDA-MB-231 cell by inducing activation of caspase-3 and cleavage of PARP.
Kinase Assay
Op fluorescentiepolarisatie gebaseerde assays voor XIAP, cIAP1 en cIAP2 BIR3-eiwitten
FL-AT-406 (het fluorescent gelabelde AT-406) wordt gebruikt om een reeks nieuwe FP-assays te ontwikkelen voor het bepalen van de bindingsaffiniteiten van Smac-mimetica aan XIAP, cIAP-1 en cIAP-2 BIR3-eiwitten. De Kd-waarde van FL-AT-406 voor elk IAP-eiwit wordt bepaald door titratie-experimenten met een vaste concentratie FL-AT-406 en verschillende concentraties van het eiwit tot volledige verzadiging. Fluorescentiepolarisatiewaarden worden gemeten met een Infinite M-1000 plaatlezer in Microfluor 2 96-wells, zwarte, rondbodemplaten. Aan elk putje worden FL-AT-406 (respectievelijk 2, 1 en 1 nM voor experimenten met XIAP BIR3, cIAP-1 BIR3 en cIAP-2 BIR3) en verschillende concentraties van het eiwit toegevoegd tot een eindvolume van 125 μL in de assaybuffer (100 mM kaliumfosfaat, pH 7,5, 100 μg/mL bovine γ-globuline, 0,02% natriumazide, met 4% DMSO). Platen worden gemengd en 2-3 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met zacht schudden. De polarisatiewaarden in millipolarisatie-eenheden (mP) worden gemeten bij een excitatiegolflengte van 485 nm en een emissiegolflengte van 530 nm. Evenwichts dissociatieconstanten (Kd) worden vervolgens berekend door de sigmoïdale dosisafhankelijke FP-toenames te fitten als functie van eiwitconcentraties met behulp van Graphpad Prism 5.0-software. In competitieve bindingsexperimenten voor XIAP3 BIR3 wordt AT-406 geïncubeerd met 20 nM XIAP BIR3-eiwit en 2 nM FL-AT-406 in de assaybuffer (100 mM kaliumfosfaat, pH 7,5; 100 μg/mL bovine γ-globuline; 0,02% natriumazide). In competitieve bindingsexperimenten voor cIAP1 BIR3-eiwit worden 3 nM eiwit en 1 nM FL-AT-406 gebruikt. In competitieve bindingsexperimenten voor cIAP2 BIR3 worden 5 nM eiwit en 1 nM FL-AT-406 gebruikt. Voor elk competitief bindingsexperiment worden polarisatiewaarden gemeten na 2-3 uur incubatie met een Infinite M-1000 plaatlezer. De IC50-waarde, de inhibitorconcentratie waarbij 50% van de gebonden tracer wordt verdrongen, wordt bepaald uit de plot met behulp van niet-lineaire kleinste-kwadratenanalyse. Curvenpassing wordt uitgevoerd met de PRISM-software. Een Ki-waarde voor AT-406 wordt berekend.
In vivo
AT-406 has good pharmacokinetic (PK) properties and oral bioavailability in mice, rats, non-human primates, and dogs. In the MDA-MB-231 xenograft, AT-406 effectively induces cIAP1 degradation and processing of procaspase-8, cleavage of PARP in tumor tissues at 100 mg/kg with well toleration even at 200 mg/kg. AT-406 induces significant tumor growth inhibition with p of 0.0012 at 100 mg/kg.
Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot cIAP-1 / XIAP / Mcl-1 / pS6K1 / Cleaved PARP
S2754-WB1
28036295
Growth inhibition assay Cell viability
S2754-viability1
28036295

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT01265199 Terminated
Acute Myelogenous Leukemia (AML)
Ascenta Therapeutics|The Leukemia and Lymphoma Society
 February 2011 Phase 1
NCT01078649 Completed
Cancer|Solid Tumors|Lymphoma|Malignancy
Debiopharm International SA
 March 29 2010 Phase 1