Home TGF-beta/Smad PKC Remmer Enzastaurin

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Enzastaurin PKC Remmer

Cat.nr.S1055

Enzastaurin is een potente, selectieve PKCβ-remmer met een IC50 van 6 nM in celvrije assays, met een 6- tot 20-voudige selectiviteit ten opzichte van PKCα, PKCγ en PKCε. Fase 3.
Enzastaurin PKC Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 515.61

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.98%
99.98

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 515.61 Formule

C32H29N5O2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 170364-57-5 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen LY317615 Smiles CN1C=C(C2=CC=CC=C21)C3=C(C(=O)NC3=O)C4=CN(C5=CC=CC=C54)C6CCN(CC6)CC7=CC=CC=N7

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 14 mg/mL (27.15 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PKCβ
(Cell-free assay)
6 nM
PKCα
(Cell-free assay)
39 nM
PKCγ
(Cell-free assay)
83 nM
PKCε
(Cell-free assay)
110 nM
In vitro

Toepassing van Enzastaurin resulteert in een duidelijke dosisafhankelijke groeiremming in alle onderzochte MM-cellijnen, waaronder MM.1S, MM.1R, RPMI 8226 (RPMI), RPMI-Dox40 (Dox40), NCI-H929, KMS-11, OPM-2 en U266, met IC50-waarden van 0,6-1,6 μM. Deze verbinding heeft directe invloed op humane tumorcellen, induceert apoptose en onderdrukt proliferatie in gekweekte tumorcellen. Het onderdrukt ook de fosforylering van GSK3βser9, ribosomaal proteïne S6S240/244 en AKTThr308, terwijl het geen direct effect heeft op VEGFR-fosforylering. Deze chemische stof verhoogt apoptose in maligne lymfocyten van CTCL. In combinatie met GSK3-remmers toonde het een versterking van cytotoxiciteitsniveaus aan. Behandeling met een combinatie van deze verbinding en de GSK3-remmer AR-A014418 leidde tot verhoogde niveaus van β-catenine totaal eiwit en β-catenine-gemedieerde transcriptie. Blokkeren van β-catenine-gemedieerde transcriptie of kleine hairpin RNA (shRNA) knockdown van β-catenine induceerde dezelfde cytotoxische effecten als die van dit plus AR-A014418. Bovendien verminderde behandeling met dit en AR-A014418 de mRNA-niveaus en oppervlakte-expressie van CD44.

Kinase Assay
Kinase-remmingsassays
De remming van de PKCβII-, PKCα-, PKCε- of PKCγ-activiteit door Enzastaurin wordt bepaald met behulp van een filterplaatassayformaat dat de 33P-incorporatie in myeline basisch proteïnesubstraat meet. Reacties worden uitgevoerd in reactievolumes van 100 μL in 96-well polystyreenplaten met de volgende uiteindelijke condities: 90 mM HEPES (pH 7,5), 0,001% Triton X-100, 4% DMSO, 5 mM MgCl2, 100 μM CaCl2, 0,1 mg/mL fosfatidylserine, 5 μg/mL diacetylglycerol, 30 μM ATP, 0,005 μCi/μL 33ATP, 0,25 mg/mL myeline basisch proteïne, seriële verdunningen van deze verbinding (1-2.000 nM) en recombinante humane PKCβII-, PKCα-, PKCε- of PKCγ-enzymen (respectievelijk 390, 169, 719 of 128 pM). De reacties worden gestart door toevoeging van het enzym en 60 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Vervolgens worden ze afgeblust met 10% H3PO4, overgebracht naar multiscreen anionische fosfocellulose 96-well filterplaten, 30 tot 90 minuten geïncubeerd, gefilterd en gewassen met 4 volumes 0,5% H3PO4 op een vacuümverdeelstuk. Scintillatiecocktail wordt toegevoegd en platen worden gelezen op een Microbeta scintillatieteller. IC50-waarden worden bepaald door een logistische vergelijking met drie variabelen te passen aan de 10-punts dosis-responscurve met behulp van ActivityBase 4.0.
In vivo

Behandeling van xenografts met Enzastaurin en straling produceerde grotere reducties in de dichtheid van microvaten dan elke behandeling afzonderlijk. De afname in microvatdichtheid kwam overeen met vertraagde tumorgroei.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p27 / Cyclin D1 / Bcl-2 / Survivin p-ERK / ERK / p-AKT / AKT PKCα / PKCβ / PKCδ / PKCε / PKCθ / p-PKCε / p-PKCθ p-eIF2a / eIF2a / p-ATF2 / ATF2 / CHOP / p21 / ATF6 / IRE1α
S1055-WB1
22253748
Growth inhibition assay Cell viability
S1055-viability1
22253748

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT03263026 Completed
Diffuse Large B-Cell Lymphoma
Denovo Biopharma LLC
 March 20 2018 Phase 3
NCT01432951 Completed
Solid Tumor|Lymphoma Malignant
Eli Lilly and Company
 November 2011 Phase 1
NCT01388335 Completed
Solid Tumor|Lymphoma Malignant
Eli Lilly and Company
 August 2011 Phase 1
NCT00744991 Completed
Cutaneous T-Cell Lymphoma
Eli Lilly and Company
 September 2008 Phase 2
NCT00709995 Completed
Metastatic Renal Cell Carcinoma
Eli Lilly and Company
 June 30 2008 Phase 2