GNF-2

Catalogusnr.S2899 Batch:S289901

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C18H13F3N4O2
Molecuulgewicht 374.32 CAS-nr. 778270-11-4
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 75 mg/mL (200.36 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GNF-2 is een zeer selectieve niet-ATP-competitieve remmer van Bcr-Abl, vertoont geen activiteit tegen Flt3-ITD, Tel-PDGFR, TPR-MET en Tel-JAK1 getransformeerde tumorcellen.
Doelen
Bcr-Abl (SUP-B15 cell line) Bcr-Abl (K562 cell line)
268 nM 273 nM
In vitro GNF-2 veroorzaakt een dosisafhankelijke groeiremming van de Bcr-abl-positieve cellijnen met IC50-waarden van 273 nM (K562) en 268 nM (SUP-B15). Deze verbinding remt de groei van Ba/F3.p210E255V en Ba/F3.p185Y253H cellen met IC50-waarden van respectievelijk 268 nM en 194 nM. Dit chemische middel (1 μM) induceert apoptose van Ba/F3.p210 cellen, evenals Ba/F3.p210E255V cellen. Het remt de cellulaire tyrosinefosforylering van Bcr-abl op een dosisafhankelijke manier met een IC50 van 267 nM. Deze verbinding (1 μM) induceert een significante afname van de niveaus van gefosforyleerd Stat5 in Ba/F3.p210 cellen. Het bindt aan de myristinezuurbindende pocket van Bcr-abl. Deze remmer remt de kinaseactiviteit van niet-gemiristoylateerd c-Abl krachtiger dan die van gemiristoylateerd c-Abl door te binden aan de myristaatbindende pocket in de C-kwab van het kinase-domein. Dit middel (10 μM) vereist BCR en/of de c-Abl SH3- en/of SH2-domeinen om BCR-Abl-afhankelijke celproliferatie te remmen. Het, maar niet een gemethyleerd GNF-2 analogon, bindt c-Abl in cellulaire extracten afkomstig van 3T3-fibroblasten. Deze verbinding (10 μM) remt op een dosisafhankelijke manier duidelijk de tyrosinefosforylering van CrkII. Het remt de fosforylering van CrkII in c-AblG2A-expresserende cellen met een IC50 van 0,051 μM. Dit chemische middel bindt in een uitgerekte conformatie in de myristaatpocket met de CF3-groep begraven op dezelfde diepte als de laatste twee koolstofatomen van het myristaatligand. Deze verbinding (10 µM) gecombineerd met imatinib (1 µM) vermindert het aantal resistente klonen tot 1 µM imatinib met ten minste 90%. Het remt de autofosforylering en proliferatie van BafF3-cellen die p210Bcr–Abl en p210Bcr–Abl mutanten tot expressie brengen. Dit middel (8 nM) in combinatie met GNF-5 (20 nM) resulteert in additieve effecten met betrekking tot de remming van de Abl64–515 kinaseactiviteit.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[2]
  • Bindingsassay

    Recombinante eiwitten (100 nM voor elk construct) of geïmmunoprecipiteerde eiwitten worden verdund in kinasebuffer (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT, en 1% glycerol). Aliquots van de verdunde eiwitten worden 30 min bij kamertemperatuur gepreïncubeerd met ofwel DMSO ofwel deze verbinding en vervolgens toegevoegd aan K-LISA PTK EAY reactieplaten. De kinasereactie wordt geïnitieerd door 0.1 mM ATP toe te voegen en mag 30 min bij kamertemperatuur verlopen. De fosforylering van GST-Abltide wordt gemonitord door SDS-PAGE en fosforimaging-analyse of autoradiografie.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    Ba/F3.p210, Ba/F3.p210E255V and Ba/F3.p185Y253H cells

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    Cells (0.3-0.6 × 106 per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO2 for 48 hours, the effect of this compound on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16415863/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19679652/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20072125/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20152788/

Klantproductvalidatie

Cell viability of K562/IR cells and their parental cell lines after exposure to different concentrations of GNF-2 for 72 h.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730 ]

Sellecks GNF-2 Is geciteerd door 8 Publicaties

A multiplexed siRNA screen identifies key kinase signaling networks of brain glia [ Life Sci Alliance, 2023, 6(5)e202201605] PubMed: 36878638
Imatinib protects against human beta-cell death via inhibition of mitochondrial respiration and activation of AMPK [ Clin Sci (Lond), 2021, 135(19):2243-2263] PubMed: 34569605
Quantitative, Wide-Spectrum Kinase Profiling in Live Cells for Assessing the Effect of Cellular ATP on Target Engagement [Vasta JD Cell Chem Biol, 2018, 25(2):206-214] PubMed: 29174542
Abl and Arg mediate cysteine cathepsin secretion to facilitate melanoma invasion and metastasis [ Sci Signal, 2018, 11(518)eaao0422] PubMed: 29463776
Coronavirus S protein-induced fusion is blocked prior to hemifusion by Abl kinase inhibitors. [ J Gen Virol, 2018, 99(5):619-630] PubMed: 29557770
Comparative Characterization of Osteoclasts Derived From Murine Bone Marrow Macrophages and RAW 264.7 Cells Using Quantitative Proteomics. [ JBMR Plus, 2018, 2(6):328-340] PubMed: 30460336
Abl kinase regulation by BRAF/ERK and cooperation with Akt in melanoma. [ Oncogene, 2017, 36(32):4585-4596] PubMed: 28368422
Contributions of MET activation to BCR-ABL1 tyrosine kinase inhibitor resistance in chronic myeloid leukemia cells. [Tsubaki M, et al. Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730] PubMed: 28418880

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.