Brefeldin A (BFA chemical)

Brefeldin A (BFA) is een schimmelmetaboliet dat het voorwaartse transport tussen het endoplasmatisch reticulum en het Golgi-apparaat blokkeert, waardoor een verstoorde distributie van de membraaneiwitten ontstaat. Wanneer HCT 116 menselijke darmkankercellen met deze verbinding worden behandeld, worden morfologische veranderingen waargenomen die celdifferentiatie aangeven. Het oefent zijn cytotoxische effecten voornamelijk uit door differentiatie en apoptose in tumorcellen te induceren. [1]

De behandeling van de strips met 20 Binnen de cel worden eiwitten voortdurend getransporteerd tussen verschillende organellen en compartimenten. Dit proces, bekend als eiwittransport, is cruciaal voor het functioneren en overleven van de cel. Het speelt een rol bij het handhaven van de celstructuur, het leveren van voedingsstoffen en het afvoeren van afvalproducten. g/mL BFA gedurende 6 uur heft de door bradykinine geïnduceerde relaxatie in aanwezigheid van 10mM indomethacine en 30 Diverse organellen en celstructuren, zoals de mitochondriën, de kern en de membranen, zijn verantwoordelijk voor het transport van eiwitten van de cel. Door dit proces te moduleren, kan de therapeutische werkzaamheid van geneesmiddelen bij de behandeling van kanker en andere ziekten worden verbeterd. M L-NOARG volledig op. De behandeling met 20 Binnen de cel worden eiwitten voortdurend getransporteerd tussen verschillende organellen en compartimenten. Dit proces, bekend als eiwittransport, is cruciaal voor het functioneren en overleven van de cel. Het speelt een rol bij het handhaven van de celstructuur, het leveren van voedingsstoffen en het afvoeren van afvalproducten. g/mL van deze verbinding heft de door bradykinine geïnduceerde dalingen in [Ca²⁺]_i en spanning in het concentratiebereik tussen 1 nM en 1 mM aanzienlijk op. Het heeft geen effect op de [Ca²⁺]_i-verhoging in endotheelcellen geïnduceerd door bradykinine of substantie P. [2]

Toevoeging van de schimmelmetaboliet beïnvloedt de spontane fosfolipide-afhankelijke GTPS-binding aan myr-rARF1 niet, maar heft de door retina-isotonisch extract (RIE) gekatalyseerde uitwisseling volledig op, met een halfmaximale inhibitie bij 2 Diverse organellen en celstructuren, zoals de mitochondriën, de kern en de membranen, zijn verantwoordelijk voor het transport van eiwitten van de cel. Door dit proces te moduleren, kan de therapeutische werkzaamheid van geneesmiddelen bij de behandeling van kanker en andere ziekten worden verbeterd. M. Het voorkomt een breed scala aan membraanverkeersroutes en remt een ADP-ribosylatiefactor-specifieke guanine nucleotide uitwisselingsactiviteit die aanwezig is in Golgi-membranen of in hersencystosol. De volledige preventie door deze verbinding suggereert sterk dat het retina-extract een ARF-specifieke guanine nucleotide uitwisselingsfactor bevat. Door retina-isotonisch extract (RIE) gekatalyseerde GTPS-afgifte van beide ADP-ribosylatiefactoren (ARF's) wordt slechts gedeeltelijk geremd door BFA, zelfs bij 300 Diverse organellen en celstructuren, zoals de mitochondriën, de kern en de membranen, zijn verantwoordelijk voor het transport van eiwitten van de cel. Door dit proces te moduleren, kan de therapeutische werkzaamheid van geneesmiddelen bij de behandeling van kanker en andere ziekten worden verbeterd. M. [3]

Het induceert fusie van het Golgi-apparaat met het ER en heft het remmende effect van de CERT-remmer HPA-12 op. Behandeling met deze verbinding, die fusie van het Golgi-apparaat en het ER induceert, redt de limonoid-geïnduceerde preventie van sfingomyelinebiosynthese. De behandeling van CHO-cellen veroorzaakt een 2- tot 3-voudige toename van de sfingomyelinese. [4]

Naast B-CLL-cellen veroorzaakt BFA naar verluidt apoptose in multipel myeloom (U266, NCI-H929), Jurkat, HeLa, leukemie (HL60, K562, BJAB), colon (HT-29) en prostaat, evenals adenoid cystisch sarcoomcellen. De toediening van 25 ng/mL van deze verbinding blokkeert de groei van HF4.9- en HF28RA-cellen volledig, terwijl hogere doses (75 ng/mL) nodig zijn om hetzelfde effect te bereiken in HF1A3-cellen. Celproliferatie wordt binnen 24 uur dosisafhankelijk geremd en, afhankelijk van de cellijn, wordt bijna volledige stopzetting van ³H-thymidine-incorporatie waargenomen bij 50-75 ng/mL (26%, 76%, 87% inhibitie bij 50 ng/ml en 75%, 87%, 92% inhibitie bij 75 ng/mL voor respectievelijk HF1A3-, HF4.9- en HF28RA-cellen. BFA-geïnduceerde celdoding is dosisafhankelijk met behulp van de YO-PRO 1/PI-test. [5]

Het kan de HDR-efficiëntie (homology-directed repair) verbeteren en is een versterker van CRISPR-gemedieerde HDR[6].

Brefeldin A (BFA), een lactonantibioticum en specifieke remmer van eiwittransport, blokkeert het transport van gesecreteerde en membraaneiwitten van het endoplasmatisch reticulum naar het Golgi-apparaat.

• Cellijnen

  Human follicular lymphoma cell lines HF1A3, HF4.9 and HF28RA

• Concentraties

  0 ng/mL -75 ng/mL

• Incubatietijd

  5 days

• Methode

  HF1A3, HF4.9 cell viability upon the treatments is tested using double staining of cells with YO-PRO 1/PI and SYTO16/PI probes. To access cell proliferation, cells are treated with 0–100 ng/mL Brefeldin A (BFA) in complete medium for 20 hours before adding 1 μCi/mL [methyl-³H]-thymidine for additional 4 hours at 37 °C. The incorporated radioactive thymidine is quantified by scintillation counting with Microbeta counter. To examine long-term effects of this compound, cells are seeded at initial concentration 10⁵ cells/mL and treated with 0-75 ng/mL of it for up to 5 days. At the time indicated, a sample of cells is removed and viable cell number is assessed by standard Trypan Blue exclusion assay.

• Dierlijke modellen

  C57BL/6 mice

• Doseringen

  250 µg

• Toediening

  i.p.