WZ4003

N° de catalogueS7317 Lot:S731701

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Données techniques

Formule

C25H29ClN6O3
Poids moléculaire 496.99 N° CAS 1214265-58-3
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 10 mg/mL (20.12 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Ajoutez les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.

 0.350mg/ml (0.70mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 7 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.

 0.350mg/ml (0.70mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 7 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description WZ4003 est un inhibiteur très spécifique de la NUAK kinase avec une IC50 de 20 nM et 100 nM pour NUAK1 et NUAK2 dans des essais cellulaires, respectivement, sans inhibition significative sur 139 autres kinases.
Cibles
NUAK1
(Cell-free assay)		 NUAK2
(Cell-free assay)
20 nM 100 nM
In vitro Dans les cellules HEK-293 exprimant la NUAK1 de type sauvage, WZ4003 (3–10 μM) supprime nettement la phosphorylation de MYPT1 médiée par NUAK1. De plus, ce composé (10 μM) inhibe la phosphorylation de MYPT1 Ser445 ainsi que la migration, l'invasion et la prolifération cellulaires dans une mesure similaire à l'inactivation ("knock out") dans les MEF ou la réduction d'expression ("knock down") de NUAK1 dans les cellules U2OS. Il présente également une affinité élevée et spécifique pour l'EGFR mutant L858R/T790M, avec une IC50 cellulaire significativement réduite contre les cellules Ba/F3 contenant T790M.

Protocole (de référence)

Test kinase :[1]
  • Détermination de l'IC50

    Les enzymes GST–NUAK1, GST–NUAK1[A195T] et GST–NUAK2 actives sont purifiées à l'aide de glutathion–Sépharose à partir de lysats de cellules HEK-293 36 à 48 h après la transfection transitoire de constructions mammaliennes pEBG2T exprimant les NUAK1, NUAK1[A195T] ou NUAK2 marquées GST N-terminal. Pour les essais de kinase peptidique, des plaques à 96 puits sont utilisées et chaque réaction est effectuée en triple. Chaque réaction est préparée dans un volume total de 50 μL contenant 100 ng de NUAK1 (type sauvage ou mutant A195T) ou de NUAK2 dans 50 mM Tris/HCl (pH 7,5), 0,1 mM EGTA, 10 mM acétate de magnésium, 200 μM Sakamototide, 0,1 mM [γ -32P]ATP (450–500 c.p.m./pmol) et les concentrations indiquées d'inhibiteurs dissous dans du DMSO. Après incubation pendant 30 min à 30°C, les réactions sont terminées par l'ajout de 25 mM (final) d'EDTA pour chélater le magnésium. Ensuite, 40 μL du mélange réactionnel sont déposés sur du papier P81 et immergés dans de l'acide orthophosphorique à 50 mM. Les échantillons sont lavés trois fois dans de l'acide orthophosphorique à 50 mM, suivis d'un rinçage unique à l'acétone et d'un séchage à l'air. L'incorporation de [γ -32P]ATP dans la Sakamototide est quantifiée par comptage Cerenkov. Les valeurs sont exprimées en pourcentage du contrôle DMSO. Les courbes d'IC50 sont développées et les valeurs d'IC50 sont calculées à l'aide du logiciel GraphPad Prism.
Test cellulaire :[1]
  • Lignées cellulaires

    U2OS cells, and MEFs

  • Concentrations

    ~10 μM

  • Temps dincubation

    5 days

  • Méthode

    Cell proliferation assays are carried out colorimetrically in 96-well plates using the CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay kit following the manufacturer’s protocol. Initially, 2000 cells per well are seeded for U2OS cells and 3000 cells per well are seeded for MEFs. The proliferation assays are carried out over 5 days in the presence or absence of 10 μM this compound.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24171924/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20033049/

Validation du produit par le client

<p>The AMPK inhibitor, WZ4003, and the p38 MAPK inhibitor, SB203580, could inhibit the APN-induced overexpression of CXCL1 and CXCL8 and h-JBMMSCs chemotaxis. After treated with WZ4003 and SB203580, the expression of CXCL1 (A and B) and CXCL8 (C and D) in the cells and supernatants of h-JBMMSCs treated with or without APN was evaluated by the ELISA assay (n = 3; *P < 0.05; **P < 0.01)</p>

, , J Cell Mol Med, 2017, 21(7):1411-1419

Indicated cells were treated with LPS (200 ng/ml) in the absence or presence of indicated AMPK activators (AICAR [100 μM] and A-769662 [2 μM]) or inhibitors (compound C [200 nM] and WZ4003 [100 nM]) for 24 hours. OCR and ECAR were monitored (n=3, *p < 0.05 versus single LPS group).

Données de [ , , Brain Behav Immun, 2018, 72:89-100 ]

De Selleck WZ4003 A été cité par 15 Publications

NUAK1 activates STAT5/GLI1/SOX2 signaling to enhance cancer cell expansion and drives chemoresistance in gastric cancer [ Cell Rep, 2024, 43(7):114446] PubMed: 38996065
The Roles and Regulatory Mechanisms of Tight Junction Protein Cingulin and Transcription Factor Forkhead Box Protein O1 in Human Lung [ Int J Mol Sci, 2024, 25(3):1411.] PubMed: 38338691
The Roles and Regulatory Mechanisms of Tight Junction Protein Cingulin and Transcription Factor Forkhead Box Protein O1 in Human Lung Adenocarcinoma A549 Cells and Normal Lung Epithelial Cells [ Int J Mol Sci, 2024, 25(3)1411] PubMed: 38338691
Localized Inhibition of Protein Phosphatase 1 by NUAK1 Promotes Spliceosome Activity and Reveals a MYC-Sensitive Feedback Control of Transcription. [ Mol Cell, 2020, 77(6):1322-1339] PubMed: 32006464
Dual targeting of NUAK1 and ULK1 using the multitargeted inhibitor MRT68921 exerts potent antitumor activities [ Cell Death Dis, 2020, 11(8):712] PubMed: 32873786
Microglia-Derived Extracellular Vesicles Carrying miR-711 Alleviate Neurodegeneration in a Murine Alzheimer's Disease Model by Binding to Itpkb [ Front Cell Dev Biol, 2020, 8:566530] PubMed: 33240878
Safflor yellow A protects vascular endothelial cells from ox-LDL-mediated damage [ J Recept Signal Transduct Res, 2020, 1-8] PubMed: 33167774
WZ4003 sensitizes non-small cell lung cancer cells to gefitinib via inhibition of ARK5 and epithelial-to-mesenchymal transition [ Am J Transl Res, 2020, 12(11):7377-7385] PubMed: 33312374
Endothelial HNF4α potentiates angiogenic dysfunction via enhancement of vascular endothelial growth factor resistance in T2DM. [ J Cell Biochem, 2019, 120(8):12989-13000] PubMed: 30873661
An Ancient Chinese Herbal Decoction Containing Angelicae Sinensis Radix, Astragali Radix, Jujuba Fructus, and Zingiberis Rhizoma Recens Stimulates the Browning Conversion of White Adipocyte in Cultured 3T3-L1 Cells. [ Evid Based Complement Alternat Med, 2019, 2019:3648685] PubMed: 31316571

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