TW-37

TW-37 cible la gorge de liaison BH3 de Bcl-2 où les protéines pro-apoptotiques de Bcl-2 se lient, et montre une affinité et une sélectivité plus élevées pour Bcl-2 et Mcl-1 que pour Bcl-xL avec des valeurs de Ki de 0,29 μM, 0,26 μM et 1,11 μM, respectivement. [1] In vitro, ce composé montre un effet anti-prolifératif et pro-apoptotique significatif dans une lignée cellulaire de lymphome WSU-DLCL2 chimiorésistante de novo et des cellules primaires obtenues d'un patient atteint de lymphome sans effets sur les lymphocytes sanguins périphériques normaux. [1] Il exerce un effet inhibiteur sur la croissance et la mort cellulaire dans les cellules endothéliales avec une IC50 d'environ 1,8 μM sans effet sur les fibroblastes exposés à la même gamme de concentrations que les cellules endothéliales. De plus, cette substance chimique montre également des effets anti-prolifération dans les lignées cellulaires tumorales MCF-7, LNCaP et SLK avec une gamme de concentrations identique ou inférieure à celles requises pour inhiber la croissance des cellules endothéliales. [2]

TW-37 présente une dose maximale tolérée (MTD) de 40 mg/kg pour trois injections i.v. chez des souris immunodéficientes combinées sévères (SCID) lorsqu'il est administré seul, et améliore l'effet inhibiteur de la tumeur du régime CHOP. [1] Ce composé, administré par i.v., produit un effet antiangiogénique en diminuant la densité des microvaisseaux humains fonctionnels dans le modèle murin SCID d'angiogenèse humaine. [2] La combinaison de cette substance chimique et des inhibiteurs de MEK bloque de manière synergique la croissance des cellules de mélanome chez la souris par une réduction significative du volume et de la masse tumorale. [3]

• Essai de liaison basé sur la polarisation de fluorescence pour les protéines recombinantes Bcl-2, Bcl-XL et Mcl-1

  Pour cet essai, le peptide BH3 de 21 résidus QEDIIRNIARHLAQVGDSMDR dérivé de Bid marqué avec le FAM-Bid et les protéines recombinantes dérivées des Bcl-2, Bcl-XL et Mcl-1 humaines sont utilisés. Il est déterminé que FAM-Bid a un K_i de 11 nM pour la protéine Bcl-2, 25 nM pour la protéine Bcl-XL et 5,7 nM pour la protéine Mcl-1. L'essai de liaison compétitif pour Bcl-XL est le même que celui pour Bcl-2 avec les exceptions suivantes : 30 nM de protéine Bcl-XL et 2,5 nM de peptide FAM-Bid dans le tampon d'essai suivant [50 mM Tris-Bis (pH 7,4) et 0,01 % de gamma-globuline bovine].

• Lignées cellulaires

  HDMECs

• Concentrations

  0 - 100 μM

• Temps dincubation

  96 hours

• Méthode

  The sulforhodamine B (SRB) cytotoxicity assay is used as described. Briefly, optimal cell density for cytotoxicity assay is determined by growth curve analysis. HDMECs are seeded in a 96-well plate and allowed to adhere overnight. Drug or control is diluted in EGM2-MV and layered onto cells, which are allowed to incubate for times as indicated in the figures. Alternatively, HDMECs are coincubated with TW37 and 0 to 100 ng/mL recombinant human VEGF (rhVEGF)165 or 0 to 100 ng/mL recombinant human CXCL8. Cells are fixed on the plates by addition of cold trichloroacetic acid (10% final concentration) and incubation for 1 hour at 4 °C. Cellular protein is stained by addition of 0.4% SRB in 1% acetic acid and incubation at room temperature for 30 minutes. Unbound SRB is removed by washing with 1% acetic acid and the plates are air dried. Bound SRB is resolubilized in 10 mM unbuffered Tris-base and absorbance is determined on a microplate reader at 560 nm. Test results are normalized against initial plating density and drug-free controls. Data are obtained from triplicate wells per condition and are representative of at least three independent experiments

• Modèles animaux

  Athymic NCr-nu/nu mice bearing SK-Mel-147 melanoma xenografts

• Dosages

  ~40 mg/kg

• Administration

  Administered via i.v. or i.p.