Canertinib (CI-1033)

Le Canertinib (CI-1033) montre une excellente puissance pour l'inhibition irréversible de l'autophosphorylation de l'erbB2 dans les cellules MDA-MB 453, et démontre également une forte perméabilité dans les cellules Caco-2. [1] Ce composé seul supprime significativement l'Akt et la MAP kinase activés constitutivement, et en combinaison, il inhibe Akt tout en empêchant l'augmentation des niveaux de phosphorylation de la MAPK. Il stimule l'expression de p27 et la phosphorylation de p38 dans les cellules MDA-MB-453. [2] Le CI-1033 est très spécifique à la famille des récepteurs erbB et n'est pas sensible au PGFR, FGFR ou IR même à 50 μM. Il montre des niveaux élevés d'inhibition dans les cellules A431 exprimant l'EGFR avec une IC50 de 7,4 nM, et supprime la phosphorylation de la tyrosine de l'erbB2, de l'erbB3 et de l'erbB4 stimulée par l'héréguline avec une IC50 de 5, 14 et 10 nM, respectivement. Le composé inhibe également l'expression de pp62^c-fos en réponse à l'héréguline. [3] On prévoit qu'il modifie Cys773 de manière covalente au sein du site de liaison de l'ATP de la HER2 kinase et améliore la destruction des molécules ErbB-2 matures et immatures. [4] Ce composé induit une diminution significative de la phosphorylation mesurable des résidus tyrosine 845 et 1068 de l'EGFR, qui sont respectivement responsables de la signalisation Src et Ras/MAPK. Les résidus correspondants de Her-2, les résidus tyrosine 877 et 1248 sont déphosphorylés significativement par lui à une concentration de 3 μM ou plus. Le CI pourrait bloquer l'internalisation de l'EGFR et augmenter le taux d'apoptose dans les cellules d'ostéosarcome primaires de manière titrable. [5] De plus, il inhibe significativement la prolifération des cellules TT, TE2, TE6 et TE10 à 0,1 nM. [6]

Le Canertinib (CI-1033) montre une activité impressionnante contre les xénogreffes A431 chez les souris nues à 5 mg/kg de poids corporel. [1] Ce composé (20 à 80 mg/kg/j) atteint un degré élevé de régression tumorale dans les modèles de xénogreffes H125. [3] Son administration orale provoque une inhibition marquée de la croissance dans les xénogreffes TT, TE6 et TE10 chez les souris nues, sans décès animal et avec <10% de perte de poids. [6]

• Tests de Tyrosine Kinase

  Les tests enzymatiques pour la détermination de l'IC50 sont réalisés dans des plaques filtrantes à 96 puits dans un volume total de 0,1 mL, contenant 20 mM Hepes, pH 7,4, 50 mM vanadate de sodium, 10 μM d'ATP contenant 0,5 mCi de [³²P]ATP, 20 mg de polyacide glutamique/tyrosine, 10 ng de EGFR tyrosine kinase, et des dilutions appropriées de Canertinib (CI-1033). Tous les composants, à l'exception de l'ATP, sont ajoutés au puits et la plaque est incubée avec agitation pendant 10 min à 25 °C. La réaction est initiée par l'ajout de [³²P]ATP, et la plaque est incubée à 25 °C pendant encore 10 min. La réaction est terminée par l'ajout de 0,1 mL d'acide trichloroacétique (TCA) à 20%. La plaque est conservée à 4 °C pendant au moins 15 min pour permettre la précipitation du substrat. Les puits sont ensuite lavés cinq fois avec 0,2 mL de TCA à 10% et l'incorporation de 32P est déterminée avec un compteur de plaques Wallac β.

• Lignées cellulaires

  TT, TE2, TE6 and TE10 cells

• Concentrations

  0.1-5.0 nM

• Temps dincubation

  1, 3, 5 and 7 days

• Méthode

  Cells (1 × 10⁴) are seeded in each well of a 24-well plastic culture plate and left overnight in DMEM or RPMI-1640 supplemented with 10% FBS. The next morning, the cells are treated with the indicated concentrations of Canertinib (CI-1033) (0.1-5.0 nM) for varying periods (1, 3, 5 and 7 days). After treatment, the cells are counted using a Coulter counter. The percent of cell proliferation is calculated by this formula: treatment cell number/control cell number × 100 for each time period.

• Modèles animaux

  A431 xenografts established in nude mice

• Dosages

  ~18 mg/kg

• Administration

  Administered orally