U-73122

Catalogusnr.S8011 Batch:S801101

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C29H40N2O3
Molecuulgewicht 464.64 CAS-nr. 112648-68-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMF (verwarmd met een waterbad van 50 ºC) 24 mg/mL (51.65 mM)
DMSO 0.01 mg/mL (0.02 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Clear solution
5%DMF 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 1.000mg/ml (2.15mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified DMF stock solution to 400 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. . The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving U73122 is een krachtige Phospholipase (e.g. PLA) C (PLC)-remmer, die agonist-geïnduceerde Ca2+-stijgingen in bloedplaatjes en PMN vermindert. U73122 remt potent 5-Lipoxygenase (5-LO) bij mensen.
Doelen
PLC
In vitro

U73122 remt significant de aggregatie van menselijke bloedplaatjes, geïnduceerd door een verscheidenheid aan agonisten, waaronder collageen, trombine, ADP, arachidonzuur, met een IC50 van 1-5 μM. Deze verbinding (10 μM) remt de productie van IP3 en de daaropvolgende snelle toename van cytosolisch Ca2+, geïnduceerd door trombine of U-46619, door de hydrolyse van phosphatidyl[3H]inositol en phosphatldyl[3H]inosito1 4,5-bisfosfaat, gekatalyseerd door een oplosbare fractie van bloedplaatjes (Ki=9 en 40 μM, respectievelijk), te remmen. Het remt de productie van tromboxaan B, geïnduceerd door collageen, door de receptorgekoppelde mobilisatie van arachidonzuur te remmen. Deze chemische stof remt ook FMLP-geïnduceerde aggregatie van menselijke polymorfonucleaire neutrofielen en de bijbehorende productie van IP3 en diacylglycerol.

Deze verbinding veroorzaakt een concentratieafhankelijke remming van C5a-, FMLP-, PAF- en LTB4-geïnduceerde MPO- en B12-BP-afgifte uit met cytochalasin B behandelde PMN's. De IC50-waarden zijn 60 (FMLP), 110 (LTB4), 115 (C5a) en 120 (PAF) nM voor MPO-afgifte; en 105 (FMLP), 110 (LTB4), 120 (C5a) en 140 (PAY) nM voor B12-BP-afgifte. Het is ook een krachtige remmer van de superoxide-anionproductie door met cytochalasin B behandelde PMN's, geactiveerd met C5a of FMLP, met een IC50 van respectievelijk 160 en 300 nM. Deze chemische stof veroorzaakt onderdrukking van de stijging in [Ca2+]i, IP3-productie en DAG-productie in FMLP-gestimuleerde PMN's met een IC50 van respectievelijk 500 nM, 2 μM en 2 μM. 3 μM van deze verbinding veroorzaakt 100% remming van FMLP-geïnduceerde GTPase-activiteit. Het veroorzaakt een concentratieafhankelijke remming van de FMLP-uitgelokte associatie van PKC met de extraheerbare particulaire fractie van PMN's, maar niet met een oplosbaar preparaat van PMN PKC.

Het remt significant recombinant humaan PLC-β2, met een IC50 van ~6 μM. Deze verbinding heeft weinig effect op PLC-β1, PLC-β3 of PLC-β4. Het vermindert interleukine-8 en leukotriene B4-geïnduceerde Ca2+-flux en chemotaxis in menselijke neutrofielen met een IC50 van respectievelijk ~6 μM en ~5 μM.

1 μM van deze verbinding blokkeert bradykinine (BK)-geïnduceerde stijgingen in de intracellulaire vrije Ca2+-concentratie in ongedifferentieerde NG108-15-cellen. De IC50 voor een blootstelling van 20 minuten is ongeveer 200 nM. 1 μM van deze chemische stof produceert een kleine maar significante toename in [Ca2+]i, wat het gevolg is van Ca2+-afgifte uit een intracellulaire opslagplaats. In gedifferentieerde NG108-15-cellen blokkeert het de depolarisatie-geïnduceerde Ca2+-influx volledig. In tegenstelling hiermee remt deze verbinding in DRG-neuronen slechts licht spanningsgevoelige Ca2+-kanalen.

Het is een relatief specifieke remmer van G-eiwit-gemedieerde Phospholipase (e.g. PLA) C-activering in pancreasacini. Deze verbinding remt phosphatidylinositol (PI)-hydrolyse bij stimulatie met cholecystokinine (met 81%) of carbachol (met 73%) bij een maximale effectconcentratie van 10 μM. Deze chemische stof (10 μM) remt de stijgingen in [Ca2+]i, gestimuleerd door hoge concentraties secretagogen in fura-2-geladen acini. Het remt ook het [Ca2+]i-signaal, gegenereerd door G-eiwitten direct te stimuleren met natriumfluoride. Deze verbinding remt snel het oscillerende [Ca2+]i-signaal, opgewekt door lage concentraties cholecystokinine of carbachol.

Het verhoogt de activiteit van hPLCβ3 op een concentratie- en tijdsafhankelijke manier in een celvrij micellair systeem, met een tot 8-voudige toename van de enzymactiviteit en een EC50 van 13,6 μM. Activering van hPLCβ3 door deze verbinding vereist covalente modificatie van cysteïnes. Deze chemische stof (10 μM) activeert ook hPLCγ1 (>10-voudig) en hPLCβ2 (~2-voudig); PLC δ1 wordt noch geactiveerd, noch geremd.

In Vivo

U73122 (30 mg/kg i.p.) blokkeert de zwelling van de achterpoot van ratten met 65 en 80% op 1 en 3 uur na de carrageenan-uitdaging. Deze verbinding (0,1 mg/mL) remt de door carrageenan geïnduceerde accumulatie van macrofagen en lymfocyten in subcutane kamers bij honden met respectievelijk 65 en 74%. Deze chemische stof (30 mg/kg i.p.) remt de LPS-geïnduceerde toename van macrofaag- en lymfocyteninfiltratie en prostaglandine E2-productie (met 80%) in een muisperitonitismodel volledig, en remt ook 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetaat-geïnduceerd oedeem in muizen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Fosfoinositide-specifieke Phospholipase (e.g. PLA) C-activiteitsassay

    Assaymengsels (0,2 mL) bevatten assaybuffer (zonder leupeptine), CaCl2 (een hoeveelheid berekend om een Ca-EGTA-buffer met de vereiste vrije Ca2+-concentratie te produceren), oplosbare bloedplaatjesfractie (5-15 μg eiwit) en 4 nmol ofwel phosphatidyl[3H]inositol of phosphatidyl[3H]inositol 4,5-bisfosfaat. Substraatmengsels bestaan uit ofwel phosphatidyl[3H]inositol (3,4 Ci/mol) plus 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-fosfoethanolamine (1:0,4 M verhouding) of phosphatidyl[3H]inositol4,5-bisfosfaat (7 Ci/mol) plus 1-palmitoyl 2-oleoyl-sn-glycero-3-fosfoethanolamine (1:4 M verhouding). Substraatmengsels worden bereid als 10x suspensies van kleine unilamellaire vesicles door co-sonicatie van de lipiden in assaybuffer (Vibra Cell microprobe sonicator, 75 W, 2 keer 60 sec). U-73122 wordt aan assaymengsels toegevoegd in 2 μL DMSO. Deze hoeveelheid DMSO heeft een verwaarloosbaar effect op de Phospholipase (e.g. PLA) C-activiteit onder deze omstandigheden. Deze verbinding wordt in glazen buizen bij 37 °C gedurende 10 min geïncubeerd en vervolgens geblust met 1,6 mL chloroform/methanol/HCl (1 N) (108:108:25, per vol.). Na krachtig mengen en centrifugeren (500 g gedurende 10 min), wordt een deel (0,7 mL) van de waterige bovenlaag (0,9 mL) overgebracht naar een scintillatieflacon die 10 mL ACS-scintillatievloeistof bevat. Tritium in wateroplosbare producten (>90% zijnde inositolphosphaten) wordt gemeten door vloeistofscintillatiespectrometrie. Fosfoinositidehydrolyse onder deze omstandigheden overschrijdt nooit 10% van het totaal toegevoegde en verliep met een constante snelheid gedurende de incubatieperiode. Blanco waarden worden bepaald uit assaymengsels waarin de oplosbare bloedplaatjesfractie wordt toegevoegd na het stopreagens.
Dierstudie:

[3]
  • Dierlijke modellen

    Swiss-Webster mic

  • Doseringen

    30 mg/kg

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2147038/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2338654/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14730005/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8032885/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1629184/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21266572/

Klantproductvalidatie

<p>Effect of U73122 and XC on TFEB phosphorylation</p>

, , Cell Res, 2017, 27(6):748-763

<p>E）Average fluorescence curve of H9c2(2-1) cells treated or not with U-73122 (10 μM).</p>

, , Virus Genes, 2016, 53(2):179-189

Downstream signaling of FGFR1 is required for neuritin-mediated axonal branching. A, U0126 (10 μM), a MEK1/2 inhibitor, LY294002 (20 μM), a PI3K inhibitor, or U73122 (2 μM), a PLC inhibitor, was applied to rat granule neurons expressing EGFP or expressing EGFP and neuritin at DIV 1. Neurons were fixed and imaged at DIV 4. Representative neurons expressing neuritin are shown. Scale bar, 50 μm. B, Quantification of the number of primary branches per 100 μm of axon (control vs neuritin, DMSO: p<0.001; U0126: p=0.222; LY294002: p=0.717; and U73122: p=0.001;DMSO vs each reagent in control, U0126: p=0.693; LY294002: p=0.016; and U73122: p=0.562) and the average length of primary branches (control vs neuritin, DMSO: p<0.001; U0126: p=0.411; LY294002: p=0.395; and U73122: p=0.099; DMSO vs each reagent in control, U0126: p=0.377; LY294002: p=0.002; and U73122: p=0.881) from three or four independent experiments with n 30 for each. Control versus neuritin: ***p<0.005 (one-way ANOVA for each reagent). n.s., Not significant. DMSO versus each reagent: #p<0.05 (a one-way ANOVA followed by Tukey’s post-test for the control). ###p<0.005 (a one-way ANOVA followed by Tukey’s post-test for the control). N, Not significant, compared with DMSO.

Gegevens van [ , , J Neurosci, 2016, 36(16):4534-48. ]

A-hBD-2 treatment increased the secretion of pro- and anti-inflammatory cytokines and chemokines and the PLC signaling pathway involved in this process. (a) HaCaT cells were separately incubated with vehicle, hBD-2, A-hBD-2, or A-hBD-2 and U73122 for 6 h, and the gene expression of proand anti-inflammatory cytokines and chemokines in HaCaT cells was detected using RT-PCR. (b) HaCaT cells were separately incubated with vehicle, hBD-2, A-hBD-2, or A-hBD-2 and U73122 for 48 h, and the production of pro- and anti-inflammatory cytokines and chemokines in HaCaT cells was detected using ELISA. All experiments were performed in triplicate. Data are expressed as the mean ± SD. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001

Gegevens van [ , , Cell Physiol Biochem, 2018, 51(2):647-663 ]

Sellecks U-73122 Is geciteerd door 72 Publicaties

TLR4 endocytosis and endosomal TLR4 signaling are distinct and independent outcomes of TLR4 activation [ EMBO Rep, 2025, 10.1038/s44319-025-00444-2] PubMed: 40204912
Identification of key genes and immune infiltration mechanisms in limb ischemia-reperfusion injury: a bioinformatics and experimental study [ Front Immunol, 2025, 16:1491928] PubMed: 40416982
DPEP2 suppresses metastasis via NF-κB-mediated epithelial-mesenchymal transition and M2 polarization in p53-loss non-small cell lung cancer [ Cancer Cell Int, 2025, 25(1):408] PubMed: 41250029
Mg2+ influx mediated by TRPM7 triggers the initiation of muscle stem cell activation [ Sci Adv, 2025, 11(14):eadu0601] PubMed: 40184450
Kisspeptin-10 binding to Gpr54 in osteoclasts prevents bone loss by activating Dusp18-mediated dephosphorylation of Src [ Nat Commun, 2024, 15(1):1300] PubMed: 38346942
Impaired degradation of PLCG1 by chaperone-mediated autophagy promotes cellular senescence and intervertebral disc degeneration [ Autophagy, 2024, 10.1080/15548627.2024.2395797] PubMed: 39212196
Bactericidal/permeability-increasing protein instructs dendritic cells to elicit Th22 cell response [ Cell Rep, 2024, 43(3):113929] PubMed: 38457343
Cell-cell interaction determines cell fate of mesoderm-derived cell in tongue development through Hh signaling [ Elife, 2024, 13e85042] PubMed: 39392396
U-73122, a phospholipase C inhibitor, impairs lymphocytic choriomeningitis virus virion infectivity [ J Gen Virol, 2024, 105(12)002060] PubMed: 39688895
Microbial metabolite butyrate promotes anti-PD-1 antitumor efficacy by modulating T cell receptor signaling of cytotoxic CD8 T cell [ Gut Microbes, 2023, 15(2):2249143] PubMed: 37635362

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.