RAD001 (Everolimus)

Catalogusnr.S1120 Batch:S112027

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C53H83NO14
Molecuulgewicht 958.22 CAS-nr. 159351-69-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (104.36 mM)
Ethanol 100 mg/mL (104.36 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Everolimus is een mTOR-remmer van FKBP12 met een IC50 van 1,6-2,4 nM in een celvrije test. Everolimus induceert cel apoptose en autophagy en remt de proliferatie van tumorcellen.
Doelen
FKBP12
(Cell-free assay)		 mTOR (FKBP12)
(Cell-free assay)
1.6-2.4 nM 1.6 nM-2.4 nM
In vitro Everolimus vertoont immunosuppressieve activiteit die vergelijkbaar is met die van rapamycin. Deze verbinding concurreert met geïmmobiliseerde FK 506 voor binding aan gebiotinyleerde FKBP12 en vertoont een remmend effect op een tweeweg MLR uitgevoerd met miltcellen van BALB/c- en CBA-muizen met een IC50 van 0,12-1,8 nM. Het vertoont ook anti-angiogene/vasculaire effecten bij VEGF-geïnduceerde HUVEC-proliferatie met een IC50 van 0,12 nM en bFGF-geïnduceerde HUVEC-proliferatie met een IC50 van 0,8 nM, respectievelijk. Een recente studie toont aan dat deze chemische stof dosisafhankelijke remmende effecten vertoont op zowel de totale cellen als de stamcellen van de BT474-cellijn en de primaire borstkankercellen met een IC50 van 156 nM in totale cellen van primaire borstkankercellen en 71 nM in totale cellen van BT474-cellen. Bovendien produceert de combinatiebehandeling met deze verbinding en trastuzumab een significant verhoogde remming van de groei van kankerstamcellen, waarbij de remmingsgraad met meer dan 50% toeneemt.
In Vivo Everolimus (0,1 tot 10 mg/kg) remt dosisafhankelijk de groei van de primaire (oor) en lymfekliermetastasen van B16/BL6 melanoom, met een verminderd totaal aantal vaten en verminderde rijpe vaten. In een xenograft-diermodel van BT474-stamcellen vertoont deze verbinding significante reducties in de gemiddelde tumorgroottes (590,6 mm3), vergeleken met de controlegroep met een tumorgrootte van 698 mm3. Bovendien vermindert de combinatiebehandeling met deze verbinding en trastuzumab de xenograft-tumorgrootte (410,8 mm3) significant meer dan de behandeling met deze verbinding alleen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • FKBP12 binding assay & Mixed lymphocyte reaction (MLR)

    FKBP12 binding assay: Binding aan het FK 506 binding protein (FKBP12) wordt indirect beoordeeld door middel van een ELISA-type competitie assay. FK 506 wordt in elk individueel experiment opgenomen als standaard, en de remmende activiteit wordt uitgedrukt als relatieve IC50 vergeleken met FK 506 (rIC50 = IC50 van deze verbinding/IC50 FK 506). Mixed lymphocyte reaction (MLR): De immunosuppressieve activiteiten van RAP en zijn derivaten worden beoordeeld in een tweeweg MLR, met behulp van miltcellen van BALB/c en CBA muizen. RAP wordt in elk individueel experiment opgenomen als standaard, en de remmende activiteit wordt uitgedrukt als relatieve IC50 vergeleken met RAP (rIC50 = IC50 van deze verbinding/IC50 RAP).
Celassay:[3]
  • Cellijnen

    BT474 cell line and the primary breast cancer cells

  • Concentraties

    0.001-10 μM

  • Incubatietijd

    24 hours

  • Methode

    The 3-(4-5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide dye reduction assay (MTT assay) is used to compare the effects of Everolimus or trastuzumab on total breast cancer cells and breast CSCs. The total cells and the stem cells from the BT474 cell line and the primary breast cancer cells are respectively seeded into 96-well plates with different concentrations of the drugs, with five wells for each concentration, and the cells are cultured at 37 °C with 5 % CO2 in an incubator for 24 hours. The concentrations of this compound are 1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 μM and 10 μM, and the concentrations of trastuzumab are 0.5 μg/mL, 1 μg/mL, 10 μg/mL, 50 μg/mL, and 100 μg/mL. The combinatorial inhibitory effect of this compound and Trastuzumab on the in vitro growth of breast CSCs is examined by MTT assay as well using 10 μg/mL trastuzumab in combination of increasing concentrations of this chemical (1 nM, 10 nM, 100 nM and 1 μM). After drug treatment for 24 hours, 20 μL MTT [5 mg/mL in phosphate buffered saline (PBS)] is added to each well, and the cells are incubated at 37 °C with 5 % CO2 and saturated humidity for 4 hours. Following the subsequent removal of the supernatant, 150 μL dimethyl sulfoxide (DMSO) is added to each well, and the cells are vortexed for 10 minutes. The light absorbance (OD value) is measured for each well using an ELISA reader. Each experiment is repeated in triplicate, and dose–response curves are plotted. The probit software of the statistical software package SPSS 17.0 for Windows is used to calculate the inhibitory concentration (IC50) of this compound.
Dierstudie:[3]
  • Dierlijke modellen

    Cultured BT474 stem cells are injected beneath the left breast pad of BALB/c nude mice.

  • Doseringen

    ≤2 mg/kg

  • Toediening

    Administered via p.o.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9723437/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19223496/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22492237/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16033851/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18708754/

Klantproductvalidatie

Cytoskeleton organisation of 786-O SuR treated with NVP-LDE225 (2.5 uM), everolimus (1 uM), and their combination for 24 h was analysed by confocal microscopy. Actin-based structures were revealed by rhodaminated phalloidin staining (red fluorescence). Localisation of focal adhesion points was obtained by immunofluorescent staining of p-paxillin (green fluorescence). Merged row images show overlapping of p-paxillin and actin signals. Moreover, all captures were shown in transmitted light. Scale bars, 10 um.

Gegevens van [ Br J Cancer , 2014 , 111(6), 1168-79 ]

Treatment of the BRAFi-resistant melanoma cells with the mTOR inhibitor RAD001 did lead to substantial decrease of S6 phosphorylation in the 3 BRAFi-resistant lines K028PR, M34PR, and K029PR; however, such an inhibition failed to elicit any inhibitory effect on the expression of PD-L1.

Gegevens van [ Clin Cancer Res , 2013 , 19(3),598-609 ]

Effects on PI3K signaling. Tumor cells were treated with DMSO, BEZ-235 (5uM, 1uM), BKM-120 (5uM, 1uM), RAD-001(5uM, 1uM) or cyclopamine (2.5uM, 1uM) for 3 hr. Cells were lysed and protein was analyzed for phosphorylation of AKT and S6 (pAKT and pS6) or for GAPDH by Western blotting.

Gegevens van [ Cancer Cell , 2012 , 21(2), 155-67 ]

The phenotype of nuclear blebbing was improved in RAD001 and rapamycin treated HGPS fibroblast cells. Cells were stained with DAPI (blue), laminA/C antibody (red), and progerin antibody (green) to show nuclear location and morphology. The treatment duration is for seven weeks. Mock: vehicle (DMSO, 0.025% v/v); Rap: 0.68 uM rapamycin, Rad: 0.1 uM RAD001. (Scale bar: 10 um)

Gegevens van [ Aging (Albany NY) , 2012 , 4(2), 119-32 ]

Sellecks RAD001 (Everolimus) Is geciteerd door 798 Publicaties

Proteogenomic characterization of non-functional pancreatic neuroendocrine tumors unravels clinically relevant subgroups [ Cancer Cell, 2025, 43(4):776-796.e14] PubMed: 40185092
Ataluren improves hematopoietic and pancreatic disorders in Shwachman-Diamond syndrome patients: a compassionate program case-series [ Nat Commun, 2025, 16(1):8189] PubMed: 40897730
System analysis links SMARCD3 regulons to growth signaling and MEK inhibitor response in everolimus-resistant ER+ breast cancer cells [ Cell Rep Med, 2025, 6(11):102425] PubMed: 41260207
Haploinsufficiency of miR-143 and miR-145 reveal targetable dependencies in resistant del(5q) myelodysplastic neoplasm [ Leukemia, 2025, 39(4):917-928] PubMed: 40000845
Pancreatic Neuroendocrine Tumors Secrete Apolipoprotein E to Induce Tip Endothelial Cells That Remodel the Tumor-Stroma Ratio and Promote Cancer Progression [ Cancer Res, 2025, 85(15):2805-2819] PubMed: 40623046
Targeting the MYC oncogene with a selective bi-steric mTORC1 inhibitor elicits tumor regression in MYC-driven cancers [ Cell Chem Biol, 2025, 32(8):994-1012.e11] PubMed: 40803322
YAP1 promoter-associated noncoding RNA affects Ewing sarcoma cell tumorigenicity by regulating YAP1 expression [ Cell Mol Biol Lett, 2025, 30(1):63] PubMed: 40414844
Increased fatty acid delivery by tumor endothelium promotes metastatic outgrowth [ JCI Insight, 2025, 10(9)e187531] PubMed: 40198126
Molecular control of PDPNhi macrophage subset induction by ADAP as a host defense in sepsis [ JCI Insight, 2025, e186456] PubMed: 39903516
A phase II trial of mTORC1/2 inhibition in STK11 deficient non small cell lung cancer [ NPJ Precis Oncol, 2025, 9(1):67] PubMed: 40069402

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.